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脓毒症大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢的蛋白质组研究
中文名称: 脓毒症大鼠骨骼肌蛋白高分解代谢的蛋白质组研究
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论文编号: 3767497收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Proteomic Analysis of Protein Hyper-metabolism in Skeletal Muscles of Rats Induced by Sepsis
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 外科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 骨骼肌 脓毒症 分解反应 蛋白质组 比目鱼肌 差异蛋白 热休克
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:以蛋白降解增加为特征的骨骼肌蛋白高分解反应为脓毒症最明显的代谢改变。为了明确脓毒症骨骼肌萎缩过程中肌肉蛋白的变化,本研究采用蛋白质组学的方法比较手术对照组与盲肠结扎穿孔(cecal ligation puncture,CLP)组大鼠术后1、3、5、7d伸趾长肌与比目鱼肌蛋白图谱的变化。通过称量肌肉重量,发现伸趾长肌于CLP术后1d明显轻于手术对照组(P<0.05),而比目鱼肌重量于第3d才明显降低(P<0.05)。采用双向电泳方法于伸趾长肌中检测到16个差异蛋白,经质谱方法鉴定出12个蛋白;同时于比目鱼肌中检测到17个差异蛋白,鉴定出13个。这些差异蛋白按功能分为收缩蛋白,细胞骨架蛋白,代谢相关酶,氧化磷酸化蛋白,氧化还原蛋白,应激反应蛋白以及热休克蛋白。采用Western blot方法验证了脓毒症后VDAC2(voltage-dependent anion channel2,VDAC2),αB-crystailin(Cry AB)及cofilin2的表达规律。结果显示,CLP术后两种肌肉VDAC2表达降低,cofilin2表达升高,另外观察到Cry AB在两种肌肉中呈现相反的变化,于伸趾长肌中术后第1d起表达开始升高,而于比目鱼肌中术后第1d反而降低。我们进一步建立了地塞米松(dexamethasone,Dexa)促进L6肌管蛋白降解,热休克或胰岛素样生长因子(insulin-like growth factorⅠ,IGF-Ⅰ)抑制L6肌管蛋白降解的细胞培养模型,用以观察候选蛋白的变化规律。发现Dexa能够降低肌管中VDAC2的表达,但对Cry AB及cofilin2的表达起到增强的作用。热休克及IGF-Ⅰ均能促进三种候选蛋白的表达,并能有效干预Dexa对VDAC2表达的抑制作用。 因此,本研究从动物实验及细胞培养实验的结果中得到如下结论:1、在脓毒症的打击下,骨骼肌中氧化还原平衡紊乱为凋亡的诱发因素;2、脓毒症骨骼肌蛋白降解可能与VDAC2参与的线粒体凋亡途径活化有关;3、CryAB及cofilin2在脓毒症或Dexa刺激后的高表达,为机体的应激反应,对维护肌纤维的稳定性具有保护作用;Cry AB于伸趾长肌中的基础表达水平明显低于比目鱼肌,可能是脓毒症打击后伸趾长肌对脓毒症诱导的蛋白降解较为敏感的原因之一。
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