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慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍机制及药物干预的研究
中文名称: 慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍机制及药物干预的研究
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论文编号: 3767401收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: The Study of Mechanism and Drug Intervention on Chronic Renal Failure Related Erectile Dysfunction
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 外科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 慢性肾功能衰竭 勃起功能障碍 一氧化氮合酶 连接蛋白 磷酸二酯酶抑制剂 药物干预 阴茎海绵体
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论文简介:研究背景: 随着慢性肾功能衰竭(CRF)治疗水平的提高和慢性肾功能衰竭病人寿命的增加,人们逐渐认识到慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍(ED)已严重影响病人的生活质量,CRF病人中约57.9%患有ED。终末期肾病中,ED发病率高达85.4%(完全性ED占25.4%,中度ED占35.4%,轻度ED占24.6%),完全性ED50岁以下占52.6%,50岁以上占70.5%。性生活的不满足感、性功能障碍已成为影响病人生活质量的一个重要问题,即使在矫正年龄、性别、影响生活质量等其他变量后,性功能问题仍然对生活质量有重大的影响。E D的诊断和治疗已引起临床专家的重视,E D的治疗可提高患者的生活质量。但目前对CRF性ED机制的研究相对滞后,影响了CRF性ED的治疗效果。 阴茎勃起是在神经内分泌系统支配下,最终通过阴茎组织内L-精氨酸-一氧化氮(NO)-环磷酸鸟苷(cGMP)通路完成。一氧化氮合酶(NOS)为此通路中的关键酶,催化L-精氨酸转化为L-瓜氨酸和NO,NO生成后,激活鸟苷酸环化酶(GC)生成环磷酸鸟苷,导致阴茎海绵体平滑肌松弛、血管张力降低,促使阴茎勃起。NO化学性质不稳定,半衰期极短,很难直接检测,目前多通过测定NOS间接反映阴茎内NO的代谢情况。 缝隙连接(gap junction),又称间隙连接,是由连接相邻两个细胞之间的连接通道排列而成的一种特殊膜结构。相邻细胞间通过缝隙连接所介导的细胞间隙连接通讯(gap junction intercellular commtmication,GJIC)进行着信息、能量和物质的交换,参与细胞间物质交换的代谢偶联和电信号传递的电偶联,对细胞的新陈代谢、内环境稳定、增殖和分化等生理过程起着重要的调控作用。阴茎海绵体平滑肌细胞间隙连接的主要成分是连接蛋白43(CX43),CX43通过电偶联和代谢偶联将众多的阴茎海绵体平滑肌细胞联结成一个功能性的整体,可协调诸多平滑肌细胞之间的同步舒张,对诱导阴茎海绵体平滑肌松弛与维持阴茎勃起有重要的作用。随着社会的发展,慢性肾功能衰竭治疗水平在不断提高,技术设备也不断更新,慢性肾功能衰竭病人的平均寿命和生活质量得到了较大改善,对慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍的预防和治疗将得到更多的重视。应用有效性和安全性较高的药物治疗慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍是临床研究的重要课题。 本文通过观察慢性肾功能衰竭对大鼠勃起功能的影响,测定CRF大鼠阴茎海绵体一氧化氮和酶基因及缝隙连接蛋白CX43表达,探讨CRF性ED的发病机制,为CRF性ED的治疗提供理论依据。通过观察不同药物对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张反应的影响,为筛选临床治疗慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍的理想药物提供理论依据。 论文一:慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍的机制研究 目的:通过手术方法建立慢性肾功能衰竭大鼠模型,观察慢性肾功能衰竭对大鼠阴茎勃起功能的影响:通过检测慢性肾功能衰竭大鼠阴茎海绵体一氧化氮合酶基因表达情况及缝隙连接蛋白43表达的变化情况,探讨慢性肾功能衰竭性(CRF)阴茎勃起功能障碍的发病机制,从而有助于提高慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍的诊治水平。 方法: 1、应用SD雄性大鼠同期行5/6肾脏切除术,建立CRF动物模型,分为两组,即假手术组(NCRF组,n=6。只游离双侧肾脏,剥离肾周脂肪,未行肾切除)和CRF模型大鼠组(CRF组,n=30。同期行大鼠右侧肾全部切除,左侧肾2/3切除)。第12周检测CRF模型大鼠组与假手术组血尿素氮(BuN)和肌酐(cr)水平。第12周注射阿朴吗啡(APO,80 ug/kg)后观察CRF模型大鼠组与假手术组大鼠阴茎有无勃起、阴茎勃起次数。龟头充血及末端阴茎体出现为阴茎勃起一次。 2、第12周应用逆转录聚合酶链扩增法(RT-PER)检测CRF模型大鼠组与假手术组大鼠阴茎海绵体平滑肌内皮型一氧化氮合酶(eNOS)和神经型一氧化氮合酶(nNOS)基因表达情况。 3、第12周应用Western blot方法检测CRF模型大鼠组与假手术组大鼠阴茎海绵体缝隙连接蛋白43(CX43)表达情况。 结果: 1、NCRF组大鼠术后1周内死亡1例,死亡率16.7%,CRF组大鼠在术后1周内5只死亡,死亡率16.7%,两组比较差异无显著性(P>0.05)。CRF组大鼠血BUN、Cr分别为27.35±2.51 mmol/L、126.62±10.05 umol/L,NCRF组大鼠血BUN、Cr分别为5.40±0.42 mmol/L、51.40±4.01 umol/L,两组相比差异有显著性(P<0.05)。CRF组大鼠阴茎勃起率为(7/25),NCRF组大鼠阴茎勃起率(5/5),两组相比差异有显著性(P<0.01)。CRF组大鼠阴茎勃起次数为(1.0±0.0),NCRF组大鼠阴茎勃起次数(2.2±0.8),两组相比差异有显著性(P<0.05)。 2、CRF组大鼠阴茎海绵体组织eNOS基因定量表达(0.28±0.08)低于NCRF组(0.67±0.13),两者相比差异有显著性(P<0.01)。CRF组大鼠阴茎海绵体组织nNOS基因定量表达(0.21±0.07)低于NCRF组(0.40±0.08),两者相比差异有显著性(P<0.01)。 3、CRF组大鼠阴茎海绵体组织CX43(0.18±0.08)表达量低于NCRF组(0.53±0.27),两者相比差异有显著性(p<0.01)。 结论: 1、通过改良背部切口,行同期大鼠一侧肾切除对侧2/3肾切除建立CRF大鼠模型,大鼠死亡率无明显增加,能保证实验完成的要求。因此,同期行5/6肾脏切除术建立CRF动物模型具有可行性。慢性肾功能衰竭组大鼠阴茎勃起率、阴茎勃起次数明显低于非慢性肾功能衰竭组大鼠,说明慢性肾功能衰竭明显降低大鼠阴茎勃起功能。 2、慢性肾功能衰竭大鼠阴茎海绵体平滑肌eNOS和nNOS基因表达明显低于非慢性肾功能衰竭大鼠。阴茎海绵体平滑肌eNoS和nNOS基因表达明显降低,是慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍的重要发病机制之一。 3、慢性肾功能衰竭使大鼠阴茎海绵体组织CX43的表达明显低于非慢性肾功能衰竭大鼠,提示慢性肾功能衰竭大鼠阴茎勃起功能障碍与大鼠阴茎海绵体CX43表达减少密切相关。 论文二:药物干预对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张反应的影响 目的:通过观察不同药物对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张反应的影响,为筛选临床治疗慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍的理想药物提供理论依据。 方法: 应用10只新西兰兔行5/6肾脏切除术,建立CRF动物模型。分别于制备肾功能衰竭兔模型前和模型兔饲养4周后,检测新西兰兔血清尿素氮(BuN)和肌酐(Cr)水平。肾功能衰竭模型兔4周后切取阴茎,制备成阴茎海绵体平滑肌条,检测不同浓度的罂粟碱、硝普钠和他达拉非对由去甲肾上腺素预收缩的慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌的舒张百分比。 结果: 1、兔造模4周后,血清Scr值为126.62±10.05 u mol/L,明显高于兔造模前Scr值51.40±4.01 umol/L,两者相比差异有显著性(P<0.05)。兔造模4周后,血清BUN值为27.35±2.51 mmol/L,明显高于兔造模前BUN值为5.40±0.41mmol/L,两者相比差异有显著性(P<0.05)。 2、在10<'-8>mol/L、10<'-7>mol/L、10<'-7>/mol/L、10<'-5>mol/L及10<'-4>mol/L浓度下,同一浓度罂粟碱和硝普钠对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张百分比相比较无明显差别(P>0.05)。同一浓度下,他达拉非对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张百分比与罂粟碱、硝普钠相比较,舒张百分比均大于罂粟碱和硝普钠,且在10<'-5>mol/L、 10<'-4>mol/L浓度,他达拉非对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张百分比,与罂粟碱、硝普钠相比较有显著性差异(P<0.01)。 结论:他达拉非对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张反应的影响具有浓度依赖性,他达拉非对慢性肾功能衰竭兔阴茎海绵体平滑肌舒张反应的影响优于罂粟碱及硝普钠,他达拉非可能是治疗慢性肾功能衰竭性阴茎勃起功能障碍的理想药物。
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