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Neuropilin-1阳性T细胞免疫调节功能的研究
中文名称: Neuropilin-1阳性T细胞免疫调节功能的研究
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论文编号: 3767264收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Study on Immunoregulatory Function of Neuropilin-1 Positive T Cells
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 泌尿外科
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: Neuropilin-1 调节性T细胞 免疫调节 肿瘤免疫 Nrp-1 肿瘤细胞 Treg
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:近年来神经菌毛素(Neuropilin-1,Nip-1/NP1/Npn-1)在免疫学领域及肿瘤生物学领域的研究逐渐成为热点。Nrp-1在多种免疫细胞如树突状细胞(Dendritic cells,DC)、T细胞上都有表达,有研究提示Nrp-1可能是经典CD4+CD25+调节性T细胞(CD4+CD25+ regulatory T cells,CD4+CD25+Treg)的新表面标志分子,但Nrp-1+T细胞是否具有免疫调节功能鲜有报道。Nip-1也表达于多种肿瘤细胞上,在肿瘤增殖及扩散等生物学行为中发挥重要作用。由于各种类型的Treg在肿瘤免疫领域中的作用是目前的一个研究热点,以Nrp-1为桥梁将Treg与肿瘤免疫联系起来是值得探索的问题。 目的:研究Nrp-1在淋巴细胞及T细胞上的表达特点、Nrp-1+T细胞与经典CD4+CD25+Treg的关系及二者在肿瘤免疫中调节功能的比较,探讨Nrp-1可否作为新的Treg表面标志分子、Nrp-1+T细胞是否一种新的Treg,并对Nrp-1+T细胞在肿瘤免疫中发挥免疫调节作用的机制进行初步分析。 方法:利用流式细胞术分析Nrp-1在淋巴细胞及T细胞的表达特点、Nrp-1+T细胞与经典CD4+CD25+Treg的关系;建立小鼠B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞体外培养方法,利用荧光染料羧基荧光素乙酰乙酸(Carboxyfluorescein diacetate succinimidyl ester,CFDA-SE)标记肿瘤细胞并利用阻断抗体,经流式细胞术分析Nrp-1及其配体在肿瘤细胞体外增殖中的作用;利用先进的萤光成像技术,在体外实验中研究Nrp-1+T细胞对自然杀伤细胞(Natural killer cells,NK细胞)杀伤小鼠黑色素瘤细胞的免疫调节作用,并与经典CD4+CD25+Treg进行比较,在体内实验中(肿瘤模型),研究Nrp-1+T细胞在小鼠黑色素瘤肿瘤免疫中的调节作用。 结果:小鼠脾脏淋巴细胞中,Nrp-1+T细胞在CD4+CD25+Treg中所占的比例明显高于在CD4+CD25T细胞中所占的比例(P<0.01),CD4+CD25+Treg在Nrp-1+T细胞中所占的比例明显高于在Nrp-1-T细胞中所占的比例(P<0.01);利用萤光成像技术测得的光子数与肿瘤细胞数目/肿瘤体积之间呈良好线性相关;Nrp-1及血管内皮因子165(Vascular endothelialgrowth factor165,VEGF165)被阻断后,小鼠B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞增殖指数下降,与非阻断组相比有极显著差异(P<0.01);在体外抑制NK细胞杀伤黑色素瘤细胞的实验中,Nrp-1+T细胞组的肿瘤细胞数目在各时间点均显著高于CD4+CD25+Treg组(P<0.01),体内实验中,Nrp-1+T细胞组的肿瘤体积显著大于对照组(P<0.01)。 结论:Nrp-1+T细胞是一群与经典CD4+CD25+Treg在数量与功能上关系密切而又不同的新的T细胞亚群;体外/体内萤光成像检测均操作简便、效果直观、结果可靠。Nrp-1及VEGF165均能促进小鼠B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的增殖;Nrp-1+T细胞在体内及体外均能抑制针对小鼠B16-F10-luc-G5黑色素瘤细胞的免疫反应,这种负性免疫调节功能比经典CD4+CD25+Treg更强,其作用机制可能通过Nrp-1+T/效应性T细胞(Effective T cells,Teff)、Nrp-1+T/NK、Nrp-1+T/DC及Nrp-1+T/肿瘤细胞直接作用有关。Nrp-1可以作为Treg新的表面标志分子,Nrp-1+T细胞可能是一种新的Treg亚群,其负性免疫调节作用机制具有多样性。
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