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番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆和番茄遗传转化体系的研究
中文名称: 番茄果实蔗糖磷酸合成酶基因的克隆和番茄遗传转化体系的研究
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论文编号: 3522017收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Cloning of Sucrose Phosphate Synthase Gene in Tomato Fruit and Study on Tomato Genetic Transformation System
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 蔬菜学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 番茄 蔗糖磷酸合成酶基因 克隆 遗传转化 番茄果实 蔗糖磷酸合成酶 基因工程
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:本试验通过RT-PCR方法,克隆到了番茄果实蔗糖磷酸合成酶(SPS)基因全长cDNA,在GenBank中的登记号为AY726439。并以自交系T6为材料,对番茄的遗传转化体系进行了优化,通过农杆菌介导法,将甜瓜果实反义酸性转化酶基因转化番茄,得到了卡那霉素抗性苗,具体的研究结果:用异硫氰酸胍-苯酚-氯仿一步法,提取番茄自交系20-19果实总RNA,与GenBank中登记号为AB051216的番茄蔗糖磷酸合成酶基因高度同源,核苷酸序列的同源性为98﹪。通过番茄遗传转化体系的优化试验,确定番茄自交系T6种子消毒方法为先用酒精处理30秒,再用0.7﹪NaCLO(有效氯含量)处理20分钟,最佳的愈伤组织诱导及不定芽分化培养基为MS+ZT2.0mg/L+IAA0.5mg/L,最佳的生根壮苗培养基为MS+IAA0.5 mg/L,最适合做转化的外植体为子叶,卡那霉素的最终筛选浓度为50mg/L。采用农杆菌介导法,将甜瓜果实反义酸性转化酶基因转化番茄自交系T6,得到了卡那霉素抗性苗。
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