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猪O型口蹄疫病毒VP_1基因的原核表达及重组蛋白的反应原性检测
中文名称: 猪O型口蹄疫病毒VP_1基因的原核表达及重组蛋白的反应原性检测
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论文编号: 3521812收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Prokaryotic Expression of Porcine Foot-and-mouth Disease Virus Type O VP_1 Gene and Detecting of Re-actinogenicity of the Recombinant Protein
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 预防兽医学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 口蹄疫病毒 结构蛋白 VP_1基因 原核表达
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 口蹄疫(foot and mouth disease,FMD)是(略)(foot and mouth disease virus,FMDV)引起偶蹄动物的一种传染病,它严重危害家畜的生产力和畜产品质量,给畜牧业生产和进出口贸易造成较大的经济损失,直接威胁着国际贸易和国家声誉及人类食品卫生,因而受到人们的普遍关注.口蹄疫病毒(略)1、VP_2、VP_3、VP_4 4种结构蛋白各60个拷贝组成,其中VP_1蛋白又称1D蛋白,其基因位于基因组的2977-3615位,编码213个氨基酸,VP_1暴露在病毒颗粒的表面,是诱导产生中和抗体的主要成分. 本研究以猪O型FM(略)69代毒株为研究对象,参考已发表的VP_1基因序列,设计和合成一对引物V_1和V_2,通过逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增得到FMDV VP_1约60(略)基因,将VP_1基因和pET30a+分别用相同的限制性内切酶BamH Ⅰ/Hind Ⅲ双酶切后,用T_4DNA酶连接后转到宿主(略)筛选出阳性PETVP_1重组质粒.经测序表明,VP_1基因定向克隆到表达载体pET30a+中.将VP_1基因...
Foot and mouth disease virus(F(omitted)s a highly contagious infectious disease foot-and-mouth(FMD) in cloven-hoofed (omitted)his disease is widely endemic all over the world and often results in considerable economic losses. FMDV capsid contains 60 copies(omitted)f four structural proteins,VP_1,VP_2,VP_3 and(omitted) protein is composed of 213 amino acids, also named 1D protein, occupying 2977-3615 of FMDV RNA gen(omitted)plays a major role in inducing FMDV neutralization antibody.The study was aimed ...
目录:
摘要第5-6页
前言第6-15页
  ·口蹄疫病毒的分类地位第6页
  ·口蹄疫病毒粒子的形态特征第6页
  ·口蹄疫病毒基因组结构特征第6-7页
  ·口蹄疫病毒结构蛋白第7-8页
  ·口蹄疫病毒的复制周期第8-10页
  ·口蹄疫病毒的抗原性第10-12页
  ·口蹄疫病毒的遗传变异第12页
  ·对VP_1基因研究的重要意义第12-14页
  ·本研究的目的和意义第14-15页
材料与方法第15-25页
  ·材料第15-16页
  ·试验方法第16-25页
    ·PK原代细胞的准备第16页
    ·FMDV的培养第16-17页
    ·磷钨酸负染观察FMD病毒粒子第17页
    ·FMDV VP_1基因的扩增第17-18页
    ·重组表达载体的构建第18-20页
    ·阳性重组质粒的表达第20-21页
    ·表达产物的纯化第21-22页
    ·表达产物的鉴定第22-25页
结果第25-32页
  ·FMDV接种PK细胞产生的CPE变化第25页
  ·FMD病毒粒子磷钨酸负染结果第25-26页
  ·FMDV VP_1基因的RT-PCR扩增结果第26页
  ·PETVP_1表达载体的构建第26-28页
  ·VP_1基因的核苷酸序列测定第28页
  ·VP_1基因的原核表达第28-30页
  ·重组蛋白的反应原性鉴定第30-32页
讨论第32-35页
  ·引物设计第32页
  ·RT-PCR反应第32页
  ·重组载体PETVP_1构建第32页
  ·外源蛋白在原核表达载体pET30a+中表达第32-34页
  ·包涵体形成的可能性原因第34页
  ·重组VP_1蛋白反应原性第34-35页
结论第35-36页
参考文献第36-39页
附录第39-43页
英文摘要第43页
致谢第44页
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