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陆地棉纤维发育相关基因Ghkob的克隆及功能分析
中文名称: 陆地棉纤维发育相关基因Ghkob的克隆及功能分析
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论文编号: 3521545收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Cloning and Functional Analysis of the Fiber Growing Gene Ghkob in Upland Cotton(Gossypium Hirsutum)
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 生物化学与分子生物学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: RNAi Ghkob 纤维改良 基因克隆 RACE技术 棉花品种 陆地棉
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:本研究以陆地棉石远321为材料,利用RACE技术克隆了陆地棉的全长kob基因-Ghkob。该基因的cDNA全长2001bp,它的最大开放阅读框(ORF)有1620bp,5’非翻译区(5'-UTR)有64bp,3’非翻译区(3'-UTR)有317bp(不包括终止密码子TGA),ORF编码一个539个氨基酸的蛋白质,分子量为60.8kD。核苷酸序列及氨基酸序列的同源性比较均表明:Ghkob与已经报道的部分其他植物的kob有较高的同源性。通过对转番茄红素脱氢酶基因(phytoenedesaturase,PDS)片段的RNAi载体pAR8进行酒精诱导,证明了该酒精诱导表达载体的实效性。在此基础上,利用双链RNA技术进行了基因沉默研究,构建了Ghkob基因的RNAi载体Bar2,通过花粉管通道法转入棉花,得到转基因植株43株,PCR扩增表明外源基因转入棉花基因组中,对转基因植株胚珠进行了体外培养和酒精诱导的基因沉默,结果表明Ghkob基因的沉默导致棉花纤维发育受阻,说明Ghkob基因在纤维发育过程中具有重要作用。为了在短时间内初步研究该基因的功能,构建了酵母表达载体,利用裂殖酵母表达系统对该基因的功能进行活体分析,没有发现该基因对单核的酵母细胞的伸长有明显影响。
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