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人乳头瘤病毒16型E7病毒癌基因干扰细胞周期调控与宫颈癌关系的研究
中文名称: 人乳头瘤病毒16型E7病毒癌基因干扰细胞周期调控与宫颈癌关系的研究
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论文编号: 3521368收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Construction and Identification of Recombinant Adenovirus Genome AD-E7 Vector Carrying the Human Papillomavirus Type 16 E7 Virus Oncogene
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 妇产科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 宫颈癌 乳头瘤病毒 重组腺病毒 E7基因 穿梭质粒 克隆 分子
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 目的 构建人乳头瘤病毒16型(HPV16)E7病毒癌基因的重组腺病毒基因组,为重组腺病毒的包装打好基础,用于深入探讨E7干扰细胞周期调控的研究. 方法 ⑴采用氯仿-异戊醇(略)床证实为宫颈癌组织的DNA,PCR方法对所提DNA进行HPV16E7基因的筛选;⑵DNA Star软件辅助设计扩增(略)E7基因全长片段的引物,并在其3’和5’端分别引入Bgl Ⅱ和Hind Ⅲ酶切位点的,PCR技术从HPV16 E7阳性的宫颈癌组织中获得目的基因片段;⑶构建携带目的基因(E7基因全长片段)的重组腺(略)pAdTrack-CMV-E7;⑷限制性内切酶Pme Ⅰ线性化重组(略)用碱性磷酸酶去磷酸化处理后,QIAquick PCR Purification Kit进行酶切产物的纯化;⑸采用1×TSS两步法将腺病毒骨架质粒pAdEasy-1转化E.coli BJ5183宿主菌,筛选阳性转化子,并鉴定;⑹将线性化的pAdTrack-CMV-E7转化新鲜制备的E.coli BJ5(略)细菌(含有腺病毒骨架质粒pAdEasy-1),利用RecA~+宿主菌内的同源重组系统构建重组腺病毒基因组;...
Objective To construct recombinant adenovirus genome Ad-E7 vector car(omitted)human papillomavirus type 16 E7 virus oncogene for further being transfected into 293 cells to be packed into(omitted)study the role of HPV E7 in the regulation of cell cycle and the development of huma(omitted) carcinoma.Methods The HPV16 E7 gene was obtained by PCR(omitted)genomic DNA of cervical carcinoma tissue which was already proved to be HPV 16 E7(+).Then it was inserted into pMD18(omitted)in order to test whether its...
目录:
1 前言第7-9页
2 材料和方法第9-25页
  ·主要仪器和设备第9页
  ·主要试剂及其配置第9-11页
  ·模板和目的基因的选择第11页
  ·目的基因的获取和纯化第11-15页
  ·重组穿梭质粒的构建第15-19页
  ·在RecA+BJ5183中构建重组腺病毒第19-25页
3 结果第25-31页
  ·宫颈癌组织HPV16 E7基因的检测及目的基因的扩增结果第25页
  ·重组质粒pMD18-T-E7的鉴定结果第25-26页
  ·重组腺病毒穿梭质粒pAdTrack-CMV-E7的鉴定结果第26-28页
  ·含有骨架质粒的BJ5183细菌的鉴定结果第28页
  ·重组腺病毒基因组Ad-E7的鉴定结果第28-31页
4 讨论第31-38页
5 结论第38-39页
参考文献第39-42页
附录第42-46页
攻读硕士学位期间的研究成果第46-47页
致谢第47-48页
学位论文独创性声明和学位论文知识产权权属声明第48-49页
综述第49-64页
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