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浙江地区幽门螺杆菌hrgA基因及优势基因型的研究
中文名称: 浙江地区幽门螺杆菌hrgA基因及优势基因型的研究
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论文编号: 3444310收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Study on Helicobacter Pylori hrgA Status and Preponderant Genes of Zhejiang Province
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 病原生物学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 幽门螺杆菌 hrgA cagA vacA iceA babA 聚合酶链反应
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:本实验用PCR法检测了H.pylori中hrgA的分布及其与疾病的关系,同时研究了cagA、vacA、iceA1、babA2等基因的存在情况,以期发现我省H.pylori中的优势基因型及其与疾病的关系。 研究材料和方法:收集浙江(杭州市、岱山县等)地区因胃部不适接受胃镜检查患者的胃粘膜标本,分离培养得到H.pylori132株。其中杭州市胃粘膜标本分离培养得到H.pylori69株,浙江省岱山县标本分离培养得到H.pylori63株。患者中男性89人,女性43人,年龄16~70岁,平均年龄45.6岁;经胃镜及病理学检查诊断为慢性胃炎64例,消化性溃疡56例,胃腺癌12例。将胃粘膜标本研磨后均匀涂布在ECY选择性培养基上,37℃微需氧(5%O2、10%CO2和85%N2)环境中培养5天后,经系统鉴定(菌落特征、快速尿素酶试验、氧化酶试验、形态及染色特性)确认为H.pylori者,进一步传代培养2天扩增细菌。用标准酚/氯仿抽提法提取H.pylori基因组DNA,根据文献报道的引物,进行PCR扩增,反应参数为95℃预变性3min后,94℃变性45s,54℃退火45s,72℃延伸45s,共30个循环,再于72℃延伸7min。用琼脂糖凝胶电泳法检测PCR产物,确定H.pylori临床分离株的hrgA、cagA、vacA、iceA1、babA2各基因的阳性情况。各基因与疾病关系的分析采用x2检验,P<0.05认为有统计学意义。 研究结果和讨论:H.pylori菌株各基因PCR扩增产物大小均与报道的一致。132株临床分离的H.pylori中,hrgA基因阳性率为25.8%(34/132),与国外文献报道的亚洲菌株的研究结果一致。同一H.pylori中必存在hrgA或hpyⅢR,但两者不同时存在或缺失。hrgA基因在慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌中的检出率分别为23.4%、28.6%和25.0%,未见统计学差异。cagA基因的阳性率为100%(132/132),vacAs1a为92.4%(122/132),vacAm2为81.8%(108/132),未检测到vacAm1;iceA1基因型所占比例为83.3%(110/132);babA2阳性率则为78.9%(104/132)。除vacAm2外其他各基因在慢性胃炎、消化性溃疡及胃癌疾病分组间均未见统计学差异(P>0.05)。vacAm2在慢性胃炎、消化性溃疡中的阳性率分别为71.9%(46/64)和92.9%(52/56),x2检验结果为P<0.01(P=0.003),说明该基因阳性率在这两组疾病中存在显著差异。由于胃癌样本量偏少,故vacAm2基因阳性率在慢性胃炎与胃癌组、消化性溃疡与胃癌组之间未发现有统计学差异。 研究结论:浙江地区H.pylori中hrgA基因阳性率为25.8%,符合国外文献报道的亚洲菌株的研究结果;同一H.pylori中必存在hrgA或hpyⅢR,但两者不同时存在或缺失,与国外文献报道一致。hrgA基因在慢性胃炎、消化性溃疡和胃癌中的检出率未见统计学差异。cagA、vacAs1a/m2、iceA1、babA2为浙江地区H.pylori的优势基因型,vacAm2可能与消化性溃疡相关。
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