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哺乳细胞多环芳烃暴露的早期生物标记物研究
中文名称: 哺乳细胞多环芳烃暴露的早期生物标记物研究
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论文编号: 3444278收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Study on the Early Biomarkers for PAH Exposure in Mammalian Cell
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 营养与食品卫生
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: BPDE 生物标记物 DNA损伤 加合物 蛋白表达 蛋白质组学 双向凝胶电泳 人羊膜细胞
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:本课题利用以双向凝胶电泳作为分离技术的蛋白质组学的方法,研究经BPDE处理的人羊膜细胞FL后培养液中蛋白组成的改变,从蛋白表达水平上探讨BPDE诱导细胞分泌和由细胞外流的蛋白质。同时探讨某些关键蛋白分子表达改变与人群接触环境致癌物的早期生物标志物的相关性,为流行病学研究和高危人群的检测提供新手段。 采用蛋白质组学的方法研究BPDE诱发的细胞应答反应,建立用BPDE诱发人羊膜FL细胞产生蛋白质的差异表达和以双向凝胶电泳的分离方法进行分析:FL细胞用5nmol/L的BPDE处理2.5小时后继续培养12小时,对照组用溶剂二甲基亚砜(DMSO)处理,再用无血清、无酚红MEM培养液,继续培养6小时。6小时后,收集处理组和对照组的培养上清(在一定程度上可以模拟体液),然后提取细胞外蛋白,蛋白经超滤浓缩、冷丙酮沉淀和Bradford法定量后采用24cm,pH3-10的IPG胶条进行第一向等电聚焦,12.5%的SDS-PAGE进行第二向电泳分离,电泳后的凝胶用银染进行染色,并用Phoretix2D6.01软件对电泳结果进行数据采集和图像分析,建立BPDE暴露组和对照组的细胞外蛋白质差异表达图谱。 研究结果:BPDE处理后的FL细胞中检测到4个新出现的蛋白点,同时有3个蛋白点在BPDE处理后消失。 研究结论:在BPDE攻击的FL细胞中有一系列蛋白质表达水平的改变,提示这些蛋白质可能发生了改变。本研究结果直接证实了BPDE作用FL细胞后,细胞内发生了深刻的变化,有复杂的蛋白表达改变。通过检测细胞外液可以发现这些蛋白质的改变,这些蛋白质有可能发展为细胞遗传毒应激状态的生物标记物,而用于监测和预防个体接触环境污染物,尽早采取防治措施,避免个体的健康继续受到危害或疾病的恶化。
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