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SOX9/SOX8和Podoplanin/CD34在结直肠癌中的预后意义
中文名称: SOX9/SOX8和Podoplanin/CD34在结直肠癌中的预后意义
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论文编号: 3444262收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Prognosis Significance of SOX9/SOX8 and Podoplanin/CD34 Expression in Colorectal Cancer
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 病理学与病理生理学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 直肠癌 结肠癌 恶性肿瘤 生物标记物 病理学 病理生理学 结直肠癌
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论文简介:结直肠癌是严重危害人类健康的常见恶性肿瘤之一,其在世界范围内的发病率已居2-3位。在西方发达国家中,已经占恶性肿瘤死亡人数的第二位,仅次于肺癌。在我国现阶段恶性肿瘤死亡人数中居4-6位,并呈现逐渐上升趋势。最近,上海资料显示结直肠癌已居恶性肿瘤发病的第二位。随着我国居民生活方式和饮食结构的改变,其发病率和死亡率还会逐年上升。尽管结直肠癌的分子机制的研究已取得很大进展,但其对结直肠癌的预后还没有发生实质性影响,如何提高患者的预后生存依然是一个现实而又严峻的问题。因此人们在不断寻找新的更敏感、更特异、更有效的生物标记物,以期能够对结直肠癌的诊断、治疗和预后提供更多的帮助。基于以上目的,我们选取了SOX9、SOX8、podoplanin和CD34等标记物,以期发现结直肠癌预后相关的有效标记物。 我们收集浙江省萧山区人民医院、浙江大学第一附属医院和浙江省肿瘤医院1991-2002年间档案资料完整的全部经手术治疗并获完整随访结果的结直肠癌患者226例。所有标本均经10%中性甲醛固定、石蜡包埋后,4μm厚连续切片,行HE染色和EnVision法免疫组织化学染色。 采用SPSS13.0(forwindows)统计软件对所有数据进行单因素方差分析及显著性、相关性检验。组间资料比较采用x2检验、配对秩和检验或t检验,相关性采用Spearman分析;患者预后分析采用COX比例风险模型单因素和多因素分析(ANOVA,SNK法);生存率曲线采用Kaplan-Meier法绘制,组间差异采用Log-rank检验。以P<0.05为有显著统计学意义,所有计量数据以(-X±s)形式表示。 第一部分选取的标记物是SOX基因家族E亚族的两个新基因SOX9和SOX8,采用免疫组织化学EnVision法检测其在结直肠远端切缘正常粘膜和肿瘤组织中的表达并进一步探讨其预后意义。结果发现:在226例结直肠癌标本(大部分匹配有正常粘膜和癌旁粘膜)和41例散发性结直肠腺瘤中,SOX9、SOX8在远端切缘正常粘膜、癌旁粘膜、腺瘤和腺癌中均有表达。SOX9的表达率分别为:9.09%(10/110)、14.04%(16/114)、48.78%(20/41)、60.11%(113/188);SOX8的表达率分别为0%(0/117)、0%(0/125)、29.97%(12/41)、15.20%(31/204)。两者表达均呈现逐渐增强趋势,SOX9尤为明显。SOX9在远端切缘正常粘膜中主要表达于隐窝基底部下1/3区域,癌旁与正常大致相似,稍强于正常粘膜。在腺瘤和腺癌中,SOX9呈弥漫性高表达,表达率显著高于正常和癌旁粘膜,尤其是腺癌的浸润前沿和肿瘤芽表达更强。SOX8在正常和癌旁粘膜中亦有表达,但其染色强度明显弱于SOX9,根据二次计分法评分,其综合评分<1分,故定为阴性。有意义的是,我们发现SOX9与SOX8在腺癌中表达与组织学类型密切相关,SOX9在粘液腺癌、印戒细胞癌中表达较低,SOX8表达则主要见于粘液腺癌/印戒细胞癌。 为进一步确认SOX9、SOX8在结直肠癌中的表达与各临床病理参数及预后的关系,我们对SOX9、SOX8与各临床病理参数之间进行了相关性分析,结果发现,SOX9、SOX8与各临床病理参数之间均无显著性差异(P>0.05)。但采用COX比例风险模型单因素分析SOX9、SOX8与结直肠癌的预后时发现,SOX9高表达(≥++)、TNM分期Ⅲ/Ⅳ期、肿瘤芽增加(≥15个)和高级别腺癌与结直肠癌的不良预后显著相关(P<0.01,log-rank检验)。进一步COX多因素分析表明:SOX9高表达(≥++)、TNM分期Ⅲ/Ⅳ期和肿瘤芽增加(≥15个)是结直肠癌的独立预后因素,SOX8表达对结直肠癌的预后影响不大。提示SOX9的高表达与结直肠癌不良预后密切相关,是判断结直肠癌预后的一个独立预后指标。 第二部分选取的标记物为肿瘤微淋巴管和微血管特异标记物podoplanin和CD34。同样采用免疫组织化学EnVision法对结直肠癌及癌旁正常粘膜的微淋巴管和微血管染色,分别计数肿瘤不同区域的微淋巴管密度(microlymphaticdensity,MLD)和微血管密度(microvasculardensity,MVD),探讨结直肠癌中淋巴管和血管的分布特点及其与转移和预后的关系。结果发现:Podoplanin和CD34在正常癌旁粘膜和结直肠癌组织中均有表达,MLD较MVD明显为低。但两者在结直肠癌不同区域的分布特点具有相似性:即两者均在肿瘤前缘区最多,浅表区次之,中央区最少。尤其是MLD在中央区表达很低甚至完全缺如。MLD在癌组织、癌旁正常粘膜中的均值分别为:13.03±4.03和13.30±3.06。MVD均值分别为:31.77±8.57和29.32±11.69。MLD在肿瘤的前缘区、中央区和浅表区的均值分别为:19.64±7.21、5.64±2.87和13.86±4.61;MVD在肿瘤的前缘区、中央区和浅表区的均值分别为:40.93±11.71、21.07±8.38、34.67±12.38。相关性分析发现,前缘区MLD和中央区、浅表区以及癌旁正常粘膜MLD比较均有显著差异(P<0.05),但结直肠癌总MLD与癌旁正常粘膜MLD比较无统计学意义(P>0.05)。肿瘤前缘区MVD亦显著高于中央区、浅表区和癌旁正常粘膜MVD(P<0.05),但结直肠癌总MVD与癌旁正常粘膜无统计学差异(P>0.05)。进一步分析MLD、MVD与结直肠癌各临床病理参数时发现,结直肠癌患者中央区和浅表区MLD与各临床病理参数之间均无统计学意义(P>0.05),但前缘区MLD与浆膜累犯、TNM分期、淋巴管/血管侵犯、淋巴结转移以及远处器官转移等均有统计学意义(P<0.01或P<0.05)。结直肠癌前缘区MVD则与发病年龄、TNM分期、组织分级、肿瘤芽个数、血管/淋巴管侵犯、以及浆膜累犯等有显著统计学差异(P<0.01或P<0.05)。但浅表区、中央区和总的MVD与各临床病理学参数均无统计学意义(P>0.05)。提示前缘区MLD和MVD与肿瘤的侵袭、转移密切相关。 为进一步明确MLD、MVD与结直肠癌预后的关系,我们将患者有无肿瘤细胞淋巴管侵犯(lymphaticvesselinvasion,LVI)和血管侵犯(bloodvesselinvasion,BVI)情况作为两个独立因素,和肿瘤不同区域的MLD、MVD(以中位值为界分为高低两组)一起作Kaplan-Meier生存曲线、Log-rank单因素分析,结果显示,TNMⅢ/Ⅳ期、高级别腺癌、累犯浆膜、肿瘤芽≥15个、LVI、BVI、前缘区高MLD或高MVD等都是结直肠癌预后不良因素(p<0.05)。但是,COX比例风险模型表明,仅肿瘤TNMⅢ/Ⅳ期为结直肠癌独立预后不良指标(95%CI:1.747~5.429;Conditional,LR)。 综上所述,我们可以得出如下结论:1、SOX9过度表达是结直肠癌不良预后的独立指标。SOX9在非粘液/印戒细胞癌中相对高表达,SOX8在粘液/印戒细胞癌中高表达,提示两者在结直肠癌中作用不同。 2、结直肠癌MLD、MVD在肿瘤前缘分布最为密集,且与LVI、BVI显著相关,是反映肿瘤侵袭、转移和不良预后的有效指标。
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