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重症急性胰腺炎肺损伤和胰周感染发病机制的实验研究
中文名称: 重症急性胰腺炎肺损伤和胰周感染发病机制的实验研究
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论文编号: 3444255收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Experimental Study of Pathogenesis of Lung Injury and Peri-pancreas Infection Following Severe Acute Pancreatitis
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 内科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 小鼠 重症急性胰腺炎 肺损伤 胰周感染 重症胰腺炎 急性胰腺炎肺损伤 发病机制
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论文简介:背景:重症急性胰腺炎(severeacutepancreatitis,SAP)的病死率报道为25%,主要的发生有两个高峰:第一个高峰发生早,即在最初7天内,和多脏器功能障碍尤其呼吸功能障碍有关;第二个高峰发生晚,即在发病第二周,此时为多脏器功能衰竭合并败血症和胰周感染等。国内有关研究SAP相关肺损伤的病理生理机制尚属探索阶段。本研究采用雨蛙素联合脂多糖腹腔内联合给药的方法建立SAP模型。从Ⅱ型肺泡细胞计数、肺脏超微结构及活性氧代谢产物(丙二醛)等方面研究APALI的病理生理机制;并通过胰腺炎小鼠腹腔灌洗液细菌培养和炎症细胞凋亡和坏死情况的测定,明确肠道细菌易位和炎症细胞的坏死、凋亡与胰腺炎病程发展的相关性。 目的:探讨SAP早期肺损伤和胰周感染的病理生理机制,为探讨治疗肺损伤和胰周感染的可能新途径提供理论依据,降低SAP患者的病死率和减少医疗支出。 材料方法:研究分SAP肺损伤和胰周感染两组:肺损伤组应用ICR清洁级小鼠210只,通过雨蛙素和脂多糖联合腹腔注射造模成功,分别取造模前(0h)和造模后6h、12h、24h、72h、168h等6个观察点,每个观察点处死小鼠35只,分别通过观察其胰腺、肺脏的病理和超微结构、肺泡Ⅱ型上皮细胞计数和活性氧代谢产物含量随病程进展的演变过程;胰周感染组应用ICR小鼠30只,分设正常对照组、轻症和重症胰腺炎组各10只,造模成功后24h取其腹腔灌洗液进行需氧和厌氧菌培养,流式细胞仪测定腹腔炎症细胞的凋亡和坏死程度。数据分析利用SPSS12.0软件包处理。两样本均数差异用F检验,数据用x±s表示;分值等级差异用Radit分析,数据用样本例数表示。 结果:雨蛙素联合脂多糖小鼠腹腔内注射后,检测小鼠的血淀粉酶和胰腺病理结构的改变:小鼠胰腺呈现典型的出血、坏死病理表现,血淀粉酶值明显升高,并于造模后24小时达到峰值,之后开始下降。造模后小鼠肺脏病理结构改变表现为肺不张,肺泡渗出增多,炎性细胞浸润明显。肺脏含水量测定表明实验组较对照组肺含水量明显增多,且造模后96小时含水量明显高于12小时,均有显著性差异(p<0.01)。肺组织MDA值造模后明显升高,并于造模后24小时升至峰值,之后开始下降,相对于对照组有显著性差异。肺组织超微结构显示实验组Ⅱ型肺泡细胞数量减少,细胞内板层小体逐渐排空,线粒体内嵴模糊不清,以造模后24小时至96小时损害最为严重,而对照组肺超微结构元明显2变化。通过TTF-1多克隆抗体标记的Ⅱ型肺泡细胞计数显示造模后细胞数目开始下降,于造模后24~96小时降至谷值,之后有所上升,相对于对照组有显著性差异。造模后24小时细胞计数相对于6小时、12小时和168小时下降有显著性差异。通过对正常对照组、轻症胰腺炎组和重症胰腺炎组小鼠的胰周继发感染进行相关实验研究,显示其腹腔灌洗液细菌培养阳性率和定量以重症胰腺炎为著,轻症胰腺炎程度较轻,而对照组结果为阴性,结果均有显著性差异(p<0.01)。腹腔炎症细胞的活性检测显示轻症胰腺炎腹腔炎症细胞已有坏死、晚期凋亡的情况发生,但以正常细胞为主,而重症胰腺炎则显示以坏死和晚期凋亡细胞为主,正常细胞所占比例明显下降。 结论:通过雨蛙素联合脂多糖可以成功建造SAP小鼠模型,进行相关APALI病理生理机制研究,显示肺损伤程度以造模后24小时至96小时为著,之前进行相关干预治疗,治疗效果将会明显提高。SAP发作时腹腔内有明显血性腹水产生,其内的炎症细胞大部分发生坏死,在一定程度上促进了肠道细菌的易位进而导致胰周感染,通过激活粒细胞引发炎症介质释放等途径可作为SAP损害“二次打击”的发动因素进一步引发多脏器的功能衰竭。
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