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鸡新城疫强毒株融合蛋白部分序列的遗传变异分析及抗原性研究
中文名称: 鸡新城疫强毒株融合蛋白部分序列的遗传变异分析及抗原性研究
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论文编号: 3444118收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Study on Genetic Variation of Some Fusion Protein in High Virulent Strains of Newcastle Disease Virus and Its Antigenicity
学位类型: 硕士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 预防兽医学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 鸡新城疫病毒 遗传变异 交叉免疫保护 融合蛋白 部分序列 遗传变异分析 分离株
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:本研究对河北省保定地区鸡场分离到的两株鸡新城疫病毒(NDV)强毒株(代号分别为HBB和HBW),以及国内标准强毒株F48E9、疫苗株LaSota的F蛋白裂解位点附近的基因进行了RT-PCR扩增、克隆及序列测定。对克隆测序的4株鸡新城疫病毒的F基因与不同基因型的代表株进行同源性比较和毒力分析。并且对这4株新城疫病毒及Genbank上国内外有代表性的33株新城疫病毒共计37株F基因的389bp(1bp~389bp)长度的核苷酸片段及其相应的氨基酸序列(1aa~130aa)进行比较,建立系统发育进化树,并确定测序的4株新城疫病毒的基因型。结果显示,疫苗株LaSota同两分离株的同源性较低,核苷酸的同源性在83.8﹪~84.1﹪之间,氨基酸的同源性在84.4﹪~86.6﹪之间;国内标准强毒F48E9与LaSota及两分离株的同源性较低,核苷酸的同源性在85.6﹪~86.4﹪之间,氨基酸的同源性在84.4﹪~86.6﹪之间;两分离株核苷酸序列同源性较低,为88.2﹪,但氨基酸序列同源性较高,为93.9﹪。F48E9株F蛋白的裂解位点为112RRQRRF117,两株强毒株F蛋白的裂解位点为112RRQRRF117,符合强毒株裂解位点的特征,同毒力测定结果相一致。两分离株的F基因都没有碱基的缺失和插入,但有多处点突变,分散存在。分离株的55~61、72、84~89及128~130之间的氨基酸均高度保守,突变的氨基酸位点多集中在101~111之间。分离株HBB为基因Ⅵ型,分离株HBW为基因Ⅶ型。 同时,采用分离的基因Ⅶ型新城疫病毒毒株制成油乳剂灭活疫苗,分别以分离株和LaSota株的灭活苗免疫试验鸡,进行疫苗免疫效果比较和交叉免疫保护试验。结果显示,免疫组与对照组相比HI抗体效价差异显著,分离株灭活苗免疫组产生的HI抗体效价和LaSota灭活苗免疫组的抗体效价相差不明显,两组的升降规律也基本一致;分离株灭活苗免疫组(HI抗体效价为6log2以上时)在免疫后21、28和35天对相同剂量F48E9标准毒株和两分离株的攻毒均给予100﹪的保护,LaSota灭活苗免疫组(HI抗体效价为6log2以上时)对F48E9标准毒株也都给予100﹪的保护,对分离株保护率,除基因Ⅵ型HBB毒株在免疫后21和28天达100﹪外,其余仅为80﹪,表明NDV不同基因型毒株间的抗原性存在差异。 将遗传变异分析和交叉免疫保护试验的结果相结合,进行综合分析,结果显示疫苗株LaSota同现今流行毒株之间存在一定的抗原性差异。
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