免费论文
收费论文
发表论文
我要投稿
设为首页 招标网
联系我们
经济学|管理学|法学|计算机|医学|教育|文学|政治|艺术|哲学|更多 经济学|管理学|法律|计算机|医学|教育|文学|政治|艺术|哲学|更多
 论文搜索
  推荐服务: 论文发表 收费论文
期刊论文格式
毕业论文格式
期刊论文范文
毕业论文范文
论文致谢
毕业论文答辩
开题报告
论文选题
英文摘要书写
骨髓间充质干细胞及NYD-SP24在大鼠皮肤创伤愈合中作用的实验研究
中文名称: 骨髓间充质干细胞及NYD-SP24在大鼠皮肤创伤愈合中作用的实验研究
全文提供: 购买充值卡,就可下载本篇论文全文  
论文编号: 3122177收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Study on Bone Marrow Stem Cells and NYD-SP24 in Skin Wound Healing
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 儿科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 骨髓间充质干细胞 创伤愈合 NYD-SP24 创伤修复 大鼠 皮肤创伤愈合 肉芽组织
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
全文提供: 购买充值卡,就可下载本篇论文全文  

       论文发表:快速、低价、包过!发表论文就找论文天下

论文简介:实验目的 创伤愈合是医学领域中古老而重要的课题之一。皮肤作为一种特殊的器官,是人类与外界接触的第一道屏障,在创伤愈合中起着不容忽视的作用。随着组织工程的拓展,应用干细胞技术可望为创伤修复提供新的手段。根据发育阶段,干细胞分为胚胎干细胞和成体干细胞。胚胎干细胞的研究受到伦理学和细胞来源等方面的限制,因而成体干细胞的研究受到人们的高度重视。越来越多的证据表明,骨髓间充质干细胞(bonemarrowstromalcells,MSCs)具有多向分化潜能,能在体或离体分化为骨、软骨、脂肪、肌肉、肌腱、心肌、肝脏、神经、肾脏等多种组织细胞。由于MSCs易取材,易于体外培养扩增及外源基因的转染和表达,移植排斥反应较弱,安全性好且无伦理学方面的困扰,因而MSCs成为干细胞移植和基因治疗的种子细胞,在将来创伤愈合的临床实际中具有重大的应用前景。 成体皮肤创面修复过程及修复结果与发育紧密相关。NYD-SP24是与发育紧密相关的基因,在神经发育和可塑性中具有重要作用。在我们的另一项研究中发现,它不仅在神经发育和可塑性中具有重要作用,还与皮肤组织的损伤和修复有关。 本实验拟将大鼠MSCs体外分离培养,定向分化鉴定后移植到大鼠皮肤创面,观察MSCs对伤口愈合的作用及作用机制,并初步观察NYD-SP24在大鼠皮肤伤口愈合中的作用,从而为皮肤组织的修复重建提供新的思路。 实验方法 1.MSCs在大鼠皮肤创伤愈合中的作用及其机制 1.1分离培养扩增:从成年SD大鼠骨髓中获取骨髓,离心后置沉淀细胞于培养液培养,24h后更换培养液,弃去悬浮细胞后继续培养,每隔3---4d换液,接近融合的MSCs按1:3比例传代培养,留取第6代备用。 1.2动物分组及模型制作:制备大鼠背部皮肤全层切除伤创面并随机分为2组:MSCs组和对照组。MSCs组:将体外培养的大鼠MSCs直接注射移植到受试动物皮肤的创缘真皮内。 13创面面积测定:伤后3、6、9、12d用透明膜覆盖创面并沿创缘画线,用图像分析软件测定创面面积,并计算愈合指数。 14伤后3、6、9、12d分别取创面组织,常规石蜡制片,苏木素一伊红(HE)染色,成纤维细胞、毛细血管计数,电镜检查创面情况。 1.5伤后3、6、9、12d,称取适量创面肉芽组织,氯胺T氧化法测定羟脯氨酸含量。 1.6伤后3、6、9、12d取伤口组织,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹法(Westernblot)观察转化生长因子p1(TGF-p1)、表皮生长因子(EGF)及NYD-SP24的变化。 2.NYD-SP24在大鼠皮肤创伤愈合中的作用 2.1动物分组及模型制作:制备大鼠背部皮肤全层切除伤创面并随机分为6组~NYD-SP24过表达组,NYD-SP24RNAi组,NYD-SP24过表达+MSCs组,NYD-SP24RNAi+MSCs组,NYD-SP24抗体组和盐水对照组。NYD-SP24过表达组或NYD-SP24RNAi组的瞬时转染参照lipofectin说明书将1μg的质粒DNA导入到创面皮肤真皮。NYD-SP24过表达+MSCs组和NYD-SP24RNAi+MSCs组分别将含2x106的NYD-SP24或NYD-SP24RNAi转染的MSCs细胞悬液注射移植到创面皮肤真皮内。NYD-SP24抗体组注射NYD-SP24抗体1μg;盐水对照组注射200μl生理盐水。 2.2创面面积测定:伤后3、6、9、12d用透明膜覆盖创面并沿创缘画膜,用图像分析仪测定创面面积,计算其愈合指数。 2.3伤后3、6、9、12d分别取创面组织,常规石蜡制片,苏木素一伊红(H.E.)染色,Masson'sTrichrome染色,成纤维细胞、毛细血管计数。 2.4伤后第6d,称取适量创面肉芽组织,氯胺T氧化法测定羟脯氨酸含量。 2.5伤后24h取伤口组织,RT-PCR观察NYD-SP24的表达。 实验结果 1.MSCs在大鼠皮肤创伤愈合中的作用及其机制 1.1原代细胞经过24h体外培养后有少量贴壁细胞,换液弃去悬浮细胞后继续培养,在4d内呈相对静止状态,之后细胞生长速度加快,10d左右达到细胞融合,形态比较均一。纯化传代到第6代时细胞的形态已均一,呈扁平状或梭形。 1.2伤后第3、6、9、12d的组织切片均可见DAPI染色阳性细胞,并多聚集在肉芽组织。 13创面面积:伤后3d开始,两组动物创面逐渐缩小,形成新生表皮。伤后14d,大部份创面愈合。MSCs组愈合速度快于对照组,第9d和第12d的愈合指数差异有显著意义。 1.4组织学观察:伤后6d,MSCs处理组肉芽组织丰富,胶原丰富,成纤维细胞、新生毛细血管数目多。伤后12d,H.E.染色显示MSCs处理组新生的胶原比创伤对照组分布均匀,新生表皮较厚,细胞层数较多且分层较明显,有上皮角形成。透射电镜显示,伤后6d,MSCs处理组肉芽组织成纤维细胞活性高,对照组成纤维细胞的活性低。 1.5伤后第6d,9d,12dMSCs处理组大鼠肉芽组织羟脯氨酸含量明显升高。 1.6伤后3、6、9、12d,RT-PCR、Westemblot结果显示,MSCs处理组在伤后各相应时相点,TGF-p1、EGF、NYD-SP24表达均高于对照组,分别在第3d,第6d,第9d达到高峰,与对照组比较有显著性差异。 2.NYD-SP24在大鼠皮肤创伤愈合中的作用 2.1创面面积测定:伤后3、6、9、12d,NYD-SP24RNAi组和NYD-SP24抗体组愈合较慢,NYD-SP24过表达组和NYD-SP24+MSCs组愈合速度快于其它各组。 2.2组织学观察:伤后第3d,3组动物创面均形成较硬的痂皮;伤后6d,NYD-SP24过表达组和NYD-SP24+MSCs组成纤维细胞和毛细血管数目多,NYD-SP24RNAi组和NYD-SP24抗体组成纤维细胞和毛细血管数目少;伤后12d,NYD-SP24过表达组和NYD-SP24+MSCs组新生表皮较厚,细胞层数较多且分层较明显。伤后14d,大部份创面愈合。 2.3伤后第6d,NYD-SP24+MSCs组大鼠肉芽组织羟脯氨酸含量高,NYD-SP24RNAi组和NYD-SP24抗体组大鼠肉芽组织羟脯氨酸含量最低。 2.4伤后24h,NYD-SP24过表达组和NYD-SP24+MSCs组大鼠损伤皮肤NYD-SP24的表达增加,NYD-SP24RNAi组和NYD-SP24抗体组大鼠损伤皮肤的NYD-SP24表达最低。 结论 1.MSCs移植可促进大鼠皮肤创面愈合的速度和质量,其机制可能与MSCs表达或自分泌TGF-p1、EGF等因子有关。 2.NYD-SP24在一定程度上可以促进皮肤创伤愈合,该初步结果为皮肤损伤修复提供了新的治疗思路。
本类相关论文:
·hEGF和hbFGF cDNA导入角朊细胞后的
·皮肤撕脱伤撕脱皮瓣坏死机理的研究
·SV40转化人角朊细胞系的生物学特征及其创面移
·皮肤撕脱伤后早期继发血栓形成机理与临床救治的初
·严重创伤对细胞免疫和树突状细胞的影响及其意义
·脂肪及脂肪源性干细胞促进创面修复的基础研究
·大鼠创伤后胰岛素抵抗机制的研究
·TGF-β1/Smad3信号转导通路在创面愈合
·创伤危重患者的代谢组学研究
·肠上皮细胞谷氨酰胺载体B~0AT1/ASCT2
骨髓间充质干细胞论文 创伤愈合论文
·SDF-1-CXCR4轴在骨髓间充质干细胞移植
·计算机辅助设计、制作个性化骨缺损修复体的研究
·川芎嗪联合大鼠骨髓间充质干细胞治疗大鼠脑挫伤的
·骨髓间充质干细胞体外诱导分化为光感受器样细胞的
·损伤胰腺提取液在促进BMSCs分化为胰岛素分泌
·Kruppel样因子4(KLF4)在小鼠表皮干
·蜕皮甾酮对兔实验性皮肤伤口的促愈合作用及其机制
·常压低温等离子体的医学应用研究
·骨髓间充质干细胞移植促进皮肤创伤愈合的实验研究
·核心蛋白多糖在瘢痕组织及成纤维细胞中的表达及意
创伤修复论文 大鼠论文
·超脉冲CO_2点阵激光对皮肤作用研究
·活性氧自由基参与介导表皮生长因子刺激的角膜上皮
·冰冻干燥血小板创伤修复作用的初步研究
·重组人胸腺素β16的表达、纯化和胸腺素β16的
·人胸腺素β4在大肠杆菌中的克隆、表达、纯化及生
·神经干细胞和GABA能神经元治疗大鼠颞叶癫痫的
·阳和汤对肾阳虚变应性鼻炎大鼠鼻粘膜ICAM-1
·沙白肺炎合剂对反复感染肺炎链球菌老龄大鼠模型小
·大鼠嗅球对脑内神经发生与轴突再生的作用研究
·人羊膜间充质细胞移植对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤
皮肤创伤愈合论文 肉芽组织论文
·弱激光促进皮肤创伤愈合过程中光学参数的作用研究
·外周血来源间充质干细胞在组织工程皮肤制备中的作
·山羊表皮干细胞分离纯化的研究
·玉红膏对大鼠皮肤创面愈合修复过程中神经肽P物质
·封闭负压治疗慢性难愈性创面的应用体会
·腰椎终板Modic退变对腰椎间盘脱出自发性吸收
·开放式乳突手术后复发性耳漏的基础研究和临床治疗
·添加丙氨酰谷氨酰胺全胃肠外营养的动物实验和临床
·复方苍耳虫油膏对加速肛肠疾病术后创面愈合的实验
  推荐期刊投稿
·核农学通报
·师资培训研究
·广东教育(教研版)
·深圳大学学报(人文社会科学版)
·上海计量测试
·中国人造板
·广播歌选
·华东昆虫学报
·学子
·财贸经济
 
·美苑
·宁波节能
·电脑采购周刊
·当代审计
·上海农业学报
·实用防盲技术
·天津美术学院学报
·浙江中医药大学学报
·烟台大学学报(自然科学与工程版)
·中外健康文摘.新医学学刊
 
·大众科学.科学研究与实践
·中国组织工程研究与临床康复
·北方作家
·河北科技师范学院学报
·宇航材料工艺
·陕西环境
·China Welding
·作文新天地(初中版)
·规划师
·中华人民共和国海关总署文告
   免费论文
公共管理 | 法学 | 理学 | 医药学
政治 | 社会学 | 文学 | 艺术 | 哲学
工学 | 计算机 | 文化 | 英语论文
经济学 | 财政 税收 | 证券金融
管理学 | 会计审计 | 工商管理 | 教育
财务管理 | 论文写作指导 | 应用文
   收费论文
马列毛邓 | 哲学宗教 | 社会科学
政治法律 | 军 事 | 经 济
文化科学教育体育 | 语言文字
文学 | 艺术 | 历史地理 | 自然科学
数理化 | 天文 | 生物科学 | 医药卫生
农业科学 | 工业技术 | 交通运输
航空航天 | 环境安全
   浏览历史

联系论文网 | 收费论文 | 发表论文 | 论文翻译 | 友情链接 | 全部分类 | 网站地图 | 期刊导航
版权所有 2008-2018 论文天下 www.lunwentianxia.com 京ICP备08104503号