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心肌靶向脂质体的研究
中文名称: 心肌靶向脂质体的研究
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论文编号: 3121982收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Studies on Myocardium-Targeting Liposome
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 药剂学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 脂质体 心肌细胞 β_1-AR 心肌靶向性 bFGF
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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       论文发表:快速、低价、包过!发表论文就找论文天下

论文摘要: 大部分心血管治疗药物(特别是蛋白多肽类药物)因缺乏组织特异性或在体内易降解而难以达到心血管病变部位发挥治疗作用,本课题设计制备了心肌靶向脂质体,主要是在脂质体的表面连接具有心肌细胞靶向性(略),以促进脂(略)药物浓集于心肌(特别是缺血心肌),实现心肌靶向给药的目的. 本论文主要包括以下内容: 1 导向化合物PAC的合成及心肌细胞导向活性考察.以对羟基苯丙酸为起始原料合成了与选择性β_1-受体阻滞剂艾司洛尔(Esmolol)结构类似的亲(略)-(4-[2-羟基-(1-甲基乙胺基)丙氧基]苯基}丙酸十六醇酯(PAC).体外细胞实验研究证明PAC具有心肌细胞导向活性. 2 PAC修饰心肌靶向脂质体(PAC-L)的制备.10%PAC的加入对脂质体的(略)但能够显著提高脂质体的ζ电位(从-12.8+0.8mv增至15.6±1.1mv),PAC-L表面荷正电.PAC-L在血清中的稳定性及体内外安全性较(略) 3 PAC-L体外心肌细胞靶向性评价及机理研究.PAC-L在不同脂质浓度和不同培养时间的心肌细胞摄取均显著高于普通脂质体Plain...
To resolve the pr(omitted) the majority of cardiovascular pharmaceuticals (especially for protein and polypeptide drug) can not achieve a required therapeutic effect because of the lack o(omitted)cific affinity toward pathological site and short t_(1/2) in vivo, we designed a new myocard(omitted)ing liposome to increase the biodistribution of drugs in myocardium, especially in isc(omitted)ardium. The myocardium-targeting liposomes were modified with a myocardium targeting ligand, and the(omitted)bility...
目录:
缩略语表第14-16页
中文摘要第16-18页
ABSTRACT第18-20页
前言第21-28页
第1章 脂质体体外心肌细胞靶向性的研究方法第28-43页
  第1节 乳鼠心肌细胞的原代分离培养第28-31页
    ·仪器与材料第28页
    ·实验方法第28-30页
      ·乳鼠心肌细胞的原代分离培养第28-29页
        ·基本原理第28-29页
        ·试液的配制第29页
        ·分离培养方法第29页
      ·细胞存活率评定第29-30页
      ·纯度评定第30页
    ·实验结果第30页
    ·讨论第30-31页
  第2节 细胞蛋白总含量的测定第31-33页
    ·仪器与材料第31页
    ·实验方法第31-32页
      ·原理第31页
      ·试剂配制第31-32页
      ·标准曲线的绘制第32页
      ·细胞裂解液中细胞蛋白含量的测定第32页
    ·实验结果第32-33页
    ·讨论第33页
  第3节 NBD膜荧光标记脂质体的制备及荧光强度测定第33-36页
    ·仪器与材料第33-34页
    ·实验方法第34-35页
      ·NBD膜荧光标记脂质体的制备第34页
      ·NBD荧光的测定第34页
        ·NBD-PC标准溶液的配制第34页
        ·标准曲线的绘制第34页
        ·精密度测定第34页
      ·脂质体荧光标记率的测定第34-35页
    ·实验结果第35-36页
      ·NBD膜荧光标记脂质体的制备及荧光标记率第35页
      ·NBD荧光标准曲线第35-36页
      ·NBD荧光测定精密度和回收率第36页
    ·讨论第36页
  第4节 心肌细胞对脂质体摄取的测定第36-39页
    ·仪器与材料第36页
    ·实验方法第36-37页
      ·心肌细胞与脂质体共同培养条件的选择第36-37页
      ·心肌细胞摄取脂质体的测定方法第37页
      ·样品测定第37页
    ·实验结果第37-38页
    ·讨论第38-39页
  第5节 荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性的影响第39-42页
    ·仪器与材料第39页
    ·实验方法第39-40页
      ·NBD膜荧光标记脂质体的制备第39页
      ·荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性影响的测定第39-40页
    ·实验结果第40-41页
      ·脂质体的粒径及Zeta电位第40页
      ·荷电及 PEG修饰对脂质体心肌细胞靶向性的影响第40-41页
    ·讨论第41-42页
  本章小结第42-43页
第2章 脂质体体内心肌靶向性的研究方法第43-60页
  第1节 Calcein脂质体的制备第43-46页
    ·仪器与材料第43页
    ·实验方法第43-44页
      ·Calcein脂质体的制备第43-44页
      ·脂质体中 Calcein的含量测定第44页
        ·Calcein测定标准曲线的绘制第44页
        ·精密度测定第44页
        ·回收率测定第44页
        ·脂质体中Calcein的含量的测定第44页
    ·实验结果第44-45页
      ·Calcein测定标准曲线第44页
      ·精密度和回收率第44-45页
    ·讨论第45-46页
  第2节 组织中Calcein含量的测定方法第46-49页
    ·仪器与材料第46页
    ·实验方法第46-47页
      ·血浆中Calcein含量测定标准曲线的绘制第46页
      ·肝、脾组织中Calcein含量测定标准曲线的绘制第46-47页
      ·心、肺、肾组织中Calcein含量测定标准曲线的绘制第47页
    ·结果与讨论第47-49页
      ·血浆及组织中Calcein含量测定标准曲线第47-48页
      ·精密度与回收率第48-49页
  第3节 Calcein脂质体在小鼠体内的组织分布第49-53页
    ·仪器与材料第49页
    ·实验方法第49页
      ·Calcein脂质体的制备第49页
      ·血浆及组织样品制备第49页
    ·实验结果第49-52页
    ·讨论第52-53页
  第4节 粒径对脂质体心肌靶向性的影响第53-56页
    ·仪器与材料第53页
    ·实验方法第53-54页
      ·Calcein脂质体的制备第53页
      ·血浆及组织样品制备第53-54页
    ·实验结果第54页
    ·讨论第54-56页
  第5节 PEG修饰对脂质体心肌靶向性的影响第56-58页
    ·仪器与材料第56页
    ·实验方法第56页
      ·Calcein脂质体的制备第56页
      ·血浆及组织样品制备第56页
      ·统计学处理第56页
    ·实验结果第56-58页
    ·讨论第58页
  本章小结第58-60页
第3章 心肌靶向脂质体(PAC-L)的制备第60-77页
  第1节 导向化合物PAC的合成第60-67页
    ·仪器与材料第60页
    ·实验方法第60-61页
      ·靶向化合物PAC的合成第60-61页
      ·靶向化合物 PAC的结构鉴定第61页
    ·实验结果第61-66页
      ·靶向化合物PAC的合成第61-62页
      ·靶向化合物PAC的结构鉴定第62-66页
    ·讨论第66-67页
  第2节 PAC修饰脂质体(PAC-L)的制备第67-70页
    ·仪器与材料第67页
    ·实验方法第67-68页
      ·PAC修饰脂质体(PAC-L)的制备第67页
      ·PAC定量方法第67-68页
        ·标准曲线的绘制第67页
        ·精密度测定第67页
        ·回收率测定第67-68页
      ·PAC-L中PAC掺入率的测定第68页
    ·实验结果第68-70页
      ·PAC测定标准曲线第68-69页
      ·精密度与回收率第69页
      ·PAC掺入率第69-70页
  第3节 导向化合物的活性考察第70-72页
    ·仪器与材料第70页
    ·实验方法第70-71页
      ·NBD荧光标记的PAC-L的制备第70页
      ·PAC对脂质体与心肌细胞亲和性影响的定性观察第70页
      ·PAC加入量对PAC-L心肌细胞靶向性的影响第70-71页
    ·实验结果第71-72页
      ·PAC对脂质体与心肌细胞亲和性影响的定性观察第71页
      ·PAC加入量对PAC-L心肌细胞靶向性的影响第71-72页
    ·讨论第72页
  第4节 PAC对脂质体在血清中渗漏的影响第72-75页
    ·仪器与材料第72-73页
    ·实验方法第73页
      ·包封 Calcein的PAC-L的制备第73页
      ·PAC的加入对脂质体在血清中渗漏的影响第73页
    ·实验结果第73-74页
    ·讨论第74-75页
  第5节 PAC-L的安全性考察第75-76页
    ·仪器与材料第75页
    ·实验方法第75页
      ·PAC-L的制备第75页
      ·体外细胞安全性考察第75页
      ·体内安全性考察第75页
    ·结果与讨论第75-76页
      ·体外安全性第75-76页
      ·体内安全性第76页
  本章小结第76-77页
第4章 PAC-L的体外心肌细胞靶向性研究第77-90页
  第1节 脂质浓度及培养时间对心肌细胞摄取PAC-L的影响第77-80页
    ·仪器与材料第77页
    ·实验方法第77-78页
      ·PAC-L的制备及特征第77页
      ·脂质浓度对心肌细胞摄取的影响第77-78页
      ·培养时间对心肌细胞摄取的影响第78页
    ·实验结果第78-79页
      ·PAC-L的特征第78页
      ·脂质浓度对心肌细胞摄取的影响第78页
      ·培养时间对心肌细胞摄取的影响第78-79页
    ·讨论第79-80页
  第2节 PAC-L的心肌细胞靶向性及机理研究第80-85页
    ·仪器与材料第80页
    ·实验方法第80-81页
      ·NBD荧光标记的PAC-L的制备第80页
      ·Esmolol对心肌细胞摄取PAC-L的影响第80页
      ·心肌细胞与非心肌细胞对PAC-L的摄取第80页
      ·缺氧对心肌细胞摄取PAC-L的影响第80页
      ·PAC-L对心肌细胞摄取方式的影响第80-81页
    ·结果与讨论第81-85页
      ·Esmolol对心肌细胞摄取PAC-L的影响第81页
      ·心肌细胞与非心肌细胞对PAC-L的摄取第81-82页
      ·缺氧对心肌细胞摄取PAC-L的影响第82-83页
      ·PAC-L对心肌细胞摄取方式的影响第83-85页
  第3节 PEG修饰对心肌细胞摄取PAC-L的影响第85-86页
    ·仪器与材料第85页
    ·实验方法第85页
      ·NBD荧光标记的PAC-L的制备第85页
      ·PEG修饰对心肌细胞摄取的影响第85页
    ·实验结果第85页
    ·讨论第85-86页
  第4节 PAC-L对缺氧心肌细胞的保护作用第86-88页
    ·仪器与材料第86页
    ·实验方法第86-87页
      ·PAC-L的制备第86页
      ·PAC-L对缺氧心肌细胞的保护作用第86-87页
    ·实验结果第87页
    ·讨论第87-88页
  本章小结第88-90页
第5章 PAC-L的体内心肌靶向性研究第90-107页
  第1节 PAC-L在小鼠体内的组织分布及心肌靶向性评价第90-97页
    ·仪器与材料第90页
    ·实验方法第90-91页
      ·包封 Calcein的PAC-L的制备第90-91页
      ·血浆及组织样品制备第91页
      ·靶向性评价第91页
    ·结果与讨论第91-97页
      ·Plain-L和PAC-L的粒径及 Zeta电位第91页
      ·PAC-L在小鼠体内的组织分布第91-92页
      ·PAC-L的心肌靶向性评价第92-97页
  第2节 PEG修饰的PAC-L在小鼠体内的组织分布及心肌靶向性评价第97-106页
    ·仪器与材料第97页
    ·实验方法第97页
      ·包封 Calcein的PAC-L_(PEG)的制备第97页
      ·血浆及组织样品制备第97页
      ·靶向性评价第97页
      ·统计学处理第97页
    ·结果与讨论第97-106页
      ·Plain-L_(PEG)和 PAC-L_(PEG)的粒径及 Zeta电位第97-98页
      ·PAC-L_(PEG)在小鼠体内的组织分布第98页
      ·PAC-L_(PEG)的心肌靶向性评价第98-106页
  本章小结第106-107页
第6章 bFGF心肌靶向脂质体的制备第107-121页
  第1节 bFGF的活性及含量测定方法第107-111页
    ·仪器与材料第107页
    ·实验方法第107-110页
      ·bFGF活性测定方法第107-108页
        ·MTT活性检测法原理第107-108页
        ·MTT法测定bFGF活性第108页
      ·bFGF原液活性测定第108页
      ·bFGF含量测定方法第108-110页
        ·ELISA测定原理第108-109页
        ·ELISA测定bFGF含量第109页
        ·标准曲线的绘制第109-110页
    ·结果与讨论第110-111页
      ·bFGF原液活性测定第110页
      ·ELISA测定bFGF含量标准曲线第110-111页
  第2节 bFGF心肌靶向脂质体的制备第111-119页
    ·仪器与材料第111-112页
    ·实验方法第112-114页
      ·bFGF脂质体的制备方法第112页
      ·bFGF脂质体制备方法对蛋白活性的影响第112页
      ·bFGF脂质体包封率的测定第112页
      ·影响bFGF脂质体包封率的因素考察第112-113页
        ·Chol对包封率的影响第112页
        ·SPG对包封率的影响第112页
        ·PAC对包封率的影响第112-113页
        ·PDS-Chol对包封率的影响第113页
        ·PEG对包封率的影响第113页
        ·蔗糖对包封率及粒径的影响第113页
      ·bFGF脂质体基本处方的确定第113页
      ·bFGF脂质体的稳定性考察第113页
      ·统计学处理第113-114页
    ·结果与讨论第114-119页
      ·bFGF脂质体制备方法对蛋白活性的影响第114-115页
      ·影响bFGF脂质体包封率的因素考察第115-118页
        ·Chol对包封率的影响第115页
        ·SPG对包封率的影响第115-116页
        ·PAC对包封率的影响第116页
        ·PDS-Chol对包封率的影响第116页
        ·PEG对包封率的影响第116-117页
        ·蔗糖对包封率及粒径的影响第117-118页
      ·bFGF脂质体处方第118页
      ·bFGF脂质体的稳定性第118-119页
  本章小结第119-121页
第7章 bFGF心肌靶向脂质体的初步药效学考察第121-142页
  第1节 bFGF心肌靶向脂质体在大鼠心、肺的分布考察第121-129页
    ·仪器与材料第121页
    ·实验方法第121-122页
      ·bFGF脂质体的制备第121页
      ·组织样品制备第121-122页
      ·免疫组化染色第122页
      ·图像分析第122页
    ·实验结果第122-129页
      ·bFGF免疫组化染色第122-127页
      ·图像分析第127-129页
    ·讨论第129页
  第2节 bFGF心肌靶向脂质体对心肌保护作用的初步药效学考察第129-141页
    ·仪器与材料第129页
    ·实验方法第129-131页
      ·bFGF脂质体的制备第129-130页
      ·组织样品制备第130页
      ·心肌组织病理学检查第130页
      ·血清乳酸脱氢酶含量测定第130页
      ·心肌组织胶原含量测定第130页
      ·心肌组织丙二醛含量测定第130-131页
      ·心肌组织 ATP酶含量测定第131页
    ·实验结果第131-140页
      ·心肌组织病理学变化第131-137页
      ·血清乳酸脱氢酶含量第137页
      ·心肌组织胶原含量第137页
      ·心肌组织丙二醛含量第137页
      ·心肌组织 ATP酶含量第137-140页
    ·讨论第140-141页
  本章小结第141-142页
全文结论第142-144页
参考文献第144-151页
致谢第151-152页
作者简介第152-153页
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