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骨髓干细胞动员治疗不同月龄心肌梗死大鼠的实验研究
中文名称: 骨髓干细胞动员治疗不同月龄心肌梗死大鼠的实验研究
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论文编号: 3121585收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Therapeutic Effects of Bone Marrow Stem Cells Mobilization on Myocardial Infarction in Different Month-old Rats
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 影像医学与核医学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 心肌梗死 干细胞 动员 超声心动图 免疫组化 骨髓干细胞动员
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论文简介:骨髓干细胞动员治疗心肌梗死是利用细胞因子使主要位于骨髓中的干细胞进入外周血,通过血液循环到达梗死心肌以达到细胞移植的目的。目前关于骨髓干细胞动员治疗心肌梗死的实验研究多采用青年动物,已取得了一定的研究成果。但心肌梗死多发生于中老年,且老年人心肌梗死病情严重、预后差,同时老年人较少能耐受血管再通术或长期有效的药物治疗。因此,研究骨髓干细胞动员对老年动物(或人)心肌梗死疗效的意义更大。为此我们建立了4月龄、18月龄大鼠心肌梗死模型,以粒细胞集落刺激因子为动员剂进行骨髓干细胞动员,以超声心动图指标和心肌瘢痕指数评价其心脏结构和功能变化。并对4月龄、18月龄心肌梗死大鼠外周血CD34<'+>细胞的动员效果,心肌梗死区和缺血区CD34<'+>细胞归巢的数量,Bcl-2/Bax凋亡蛋白的表达进行探讨。 方 法 4月龄和18月龄雄性Wistar大鼠各30只,随机分为4月龄假手术组(A组,6只),4月龄心梗组(B组,6只),4月龄心梗动员组(E组,6只),4月龄心梗6d组(G组,6只),4月龄心梗动员6d组(H组,6只);18月龄假手术组(C组,6只),18月龄心梗组(D组,6只),18月龄心梗动员组(F组,6只),18月龄心梗6d组(I组,6只),18月龄心梗动员6d组(J组,6只)。建立冠状动脉前降支结扎的心肌梗死模型,建立大鼠心肌梗死模型6h后,动员组每日皮下注射重组人粒细胞集落刺激因子注射液60ug·kg<'-1>,共注射5日。以超声心动图指标和心肌瘢痕指数评价其心脏结构和功能变化。流式细胞仪检测大鼠外周血CD34<'+>细胞的比例,免疫组织化学SABC法分别检测G、H、I和J组大鼠心肌CD34<'+>细胞归巢的数量,免疫组织化学SABC法半定量Bcl-2/Bax蛋白的表达。大鼠发生心肌梗死后,左室功能明显低于假手术组;尽管制模前4月龄、18月龄大鼠心功能差异无显著性,但发生心肌梗死后,4月龄大鼠心功能好于18月龄大鼠。大鼠在心肌梗死后左心室进行性增大,心功能进行性降低。左室增大以4月龄组更显著,心功能进行性降低以18月龄组明显。4月龄和18月龄心梗大鼠的心肌瘢痕指数的差别无统计学意义。 制模后28d时E组大鼠LVEF、LVFS优于B组(P<0.01),F组大鼠LVEF、LVFS优于D组(P<0.01),4月龄和18月龄心肌梗死大鼠动员后心功能改善程度的差异无统计学意义。不同时间点B组与E组,D组与F组的LVDD和LVDS比较差异无统计学意义。4月龄和18月龄心肌梗死大鼠动员后左室重构的变化程度的差异无统计学意义。E组心肌瘢痕指数低于B组(P=0.013)和F组低于D组(P=0.048)。对所有心梗大鼠的LVEF与平均心肌瘢痕指数之间进行直线相关分析,r=0.716,P<0.01。表明二者之间存在线性负相关。 制模后3天各组CD34+细胞比值H组高于G组(P=0.001),J组高于I组(P=0.001);制模后6天各组CD34<'+>细胞比值H组高于G组(P<0.01),J组高于I组(P<0.01),H组高于J组(P=0.006)。H组CD34<'+>细胞心肌归巢的数量高于J组。H组心肌细胞Bcl-2表达的灰度值低于G组,J组低于I组,P均<0.01;各组Bax表达的灰度值差异无显著性。 4月龄大鼠和18月龄大鼠制作心肌梗死模型后心功能均进行性降低,同时发生左室重构。18月龄大鼠心肌梗死后心功能减低较4月龄大鼠明显,但4月龄大鼠左室重构更显著。干细胞动员治疗4月龄和18月龄心肌梗死大鼠后,大鼠的心功能改善,心肌瘢痕指数降低;但不同月龄心肌梗死大鼠经干细胞动员后的治疗效果无差异;心肌瘢痕指数与心功能存在负相关性。粒细胞集落刺激因子可动员造血干细胞,使心梗大鼠外周血CD34<'+>细胞水平提高。4月龄心梗大鼠动员效率和CD34<'+>细胞归巢数量高于18月龄心梗大鼠。干细胞动员治疗心肌梗死的机制可能与影响Bcl-2/Bax蛋白表达而抑制细胞凋亡有关。不同月龄大鼠心肌梗死及动员后心肌细胞凋亡无年龄差异性。
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