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CLC-3在大鼠异位心脏移植急性排斥期中的表达及意义
中文名称: CLC-3在大鼠异位心脏移植急性排斥期中的表达及意义
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论文编号: 3121572收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: The Expression of CLC-3 in Acute Cardiac Allograft Rejection in Rat
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 外科学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: CLC-3 心脏移植 大鼠 排斥反应 Bcl-2 Bax
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文简介:目前心脏移植已在临床广泛开展,全世界心脏移植每年以4000例左右的手术量增加,并取得了良好的临床疗效果,出现了一定数量生存质量高及长期存活的群体。然而,急慢性免疫排斥反应及应用抗免疫排斥反应药物的负作用仍然是影响移植物功能、受体生存时间及生活质量的关键因素。 细胞凋亡又称程序性细胞死亡(programmed cell death,PCD)是一种主动性细胞死亡方式,在维持心脏正常结构形态及心脏病理性重构方面有着重要的意义,在动物模型和人体心肌活检及尸检上的许多研究证实,心肌细胞凋亡广泛存在于心脏移植急性免疫排斥反应、移植物血管病及失活移植物中。 Bcl-2和Bax是一对与细胞凋亡最为密切的凋亡相关分子。Bcl-2和BaX的比值是决定细胞生死存亡的变阻器。Masashi以及Murray H等通过Bcl-2转基因研究发现,高表达Bcl-2能减轻缺血再灌注损伤、急性免疫排斥反应及移植冠状动脉血管病,减少心肌细胞凋亡。在不同细胞转基因中的基础研究发现,Bcl-2还参与了众多的离子通道功能的调节,高表达Bcl-2可增强细胞膜钙离子的转运能力,抑制电压门控钾通道,激活容量激活氯通道。 离子转运在缺血再灌注损伤、细胞容积调节及凋亡中有着重要的意义,CLC-3属于C1<'->通道家族β亚族,为电压门控Cl<'->通道(vohage-gatedchloride channel),目前关于CLC-3的研究虽然存在一些争议,但多项研究提示C1C-3编码了容积激活(volume-activated)C<'->通道,广泛分布于多种动物及人的心血管组织中,参与众多生理病理过程,并在心肌缺血预处理晚期保护作用中发挥重要作用。最新的研究表明CLC-3还参与了BcL-2家族在肿瘤细胞中的抗凋亡作用,并对野百合碱及毒胡罗卜素诱导的细胞 凋亡具有拮抗作用。表明ClC-3在免疫调节、细胞凋亡中有着重要的意义,然而,关于CLC-3在心脏移植急性免疫排斥反应、心肌细胞凋亡中的作用以及与Bcl-2家族的关系,目前尚不清楚。 本实验通过建立大鼠异位移植心脏模型,旨在对CLC一3在大鼠异位移植心脏急性排斥期中的表达变化进行初步的研究,以期初步了解CLC一3在移植心脏急性免疫排斥期中的作用,探讨CLC一3与心脏移植急性免疫排斥反应、心肌细胞凋亡及Bcl-2的关系及CLC一3在脏移植急性免疫排斥期中心肌细胞凋亡传导途径的作用机制。 方 法 建立大鼠腹部心脏异位移植模型,分对照组及环孢菌素(CsA)组,每组32对。术后当天至术后7天或移植心脏停止搏动,每天分别灌胃给予生理盐水及CsA(15mg/Kg)干预,每组8只用于观察移植心存活时间,术后第1、3、5、7天各6只动态切取标本,常规组织切片监测排斥反应,TUNEL法检测心肌细胞凋亡,免疫组织化法检测Bcl-2和BAX的表达计算机图像定量分析,免疫组化、RT—PCR、western blot检测移植心肌组织CLC一3的表达及分布 1.C1C一3的表达随免疫排斥反应的加重,心肌细胞凋亡的增加明显降低,推测CLC一3在不同的微环境下通过快慢门控通道的不同开放,不同离子通透性的选择,调节细胞容积,引起调节性容积回缩和调节性容积增大,增加细胞稳定性,以抵抗细胞肿胀坏死及细胞回缩凋亡。 2、CsA干预能明显改善心脏移植急性免疫排斥反应中C1C-3表达的降低,减轻心脏移植急性免疫排斥反应,减少心肌细胞凋亡。CsA除抑制T淋巴细胞的增殖和分化,减轻免疫排斥反应,尚可通过对钙神经素的抑制作用及细胞钙代谢的影响对病理状态下的心肌细胞容积激活C1 ̄通道进行调解,减少心肌细胞凋亡。 3.BAX表达的上升是心脏移植急性免疫排斥反应心肌细胞凋亡的主要原因之一,CLC-3的表达受BAX及Bcl-2的双重调节。CsA能抑制BAX的表达升高,改善CLC-3表达的下降,减少心肌细胞凋亡,减轻免疫
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