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甘蓝型油菜再生体系与农杆菌介导的甜菜碱合成基因遗传转化研究
中文名称: 甘蓝型油菜再生体系与农杆菌介导的甜菜碱合成基因遗传转化研究
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论文编号: 3116630收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Regeneration System and Agrobacterium-Mediated Transformation in Brassica Napus L.
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 植物病理学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 油菜 花茎培养 再生 幼胚培养 遗传转化 甜菜碱醛脱氢酶(BADH) 胆碱氧化酶(CMO) GUS 原位转化
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 十字花科(Cruifrae)芸薹属(Bras(略)enus)包含了一些重要的油料作物和蔬菜作物,其中有6个物种被广泛种植.甘蓝型油菜(Brassica.napus L.)是全球继大豆和棕榈油之后第三大油料作物.随着人类需(略)科技手段的不断涌现,油菜品种改良正呈多元化发展,植物转基因技术在油菜遗传改良中广泛应用,推动了油菜遗传育种工程技术进行一次新的革命.转基因技术已经成为向油菜导入新型外源基因的重要手段,转基因抗除草剂油菜、抗虫油菜、高油脂含量油菜、油菜新型不育系等已大规模投入商业化生产,抗病、抗环境逆境胁迫(干旱、盐碱、高温和低温)等新型油菜育种材(略)为重要研究课题. 本研究主要目标是,立足西北地区油菜品种,筛选最佳转化受体,建立农杆菌介导的油菜高效转化体系,获得CMO和BADH抗盐耐旱基因的油菜转化(略)因工程改良油菜奠定基础. 研究了甘蓝型油菜花茎外植体高效诱导不定芽的再生体系,结果表明:以含有2,4-D(0.5~1.0mg/L)的培养基对外植体进行预培养,以及在分化培养基中加入AgNO_3(2~6mg/(略)降低外植体褐化坏死的频率,提高了不定芽的...
The genus Brassica includes many economically importan(omitted)e, condiment and oilseed crops. Within this genus, Brassica napus L. is an important oil crop, ranking th(omitted)o soybean and palm oil in global production. Canola oil is widely used as a cooking oil,(omitted), and for the product(omitted)garine. There are several studies on Canola transformation with respect to the introduction of va(omitted)traits such as modified oil composition, herbicide tolerance, altered protein composition and ins...
目录:
摘要第4-7页
ABSTRACT第7页
第1章 文献综述第13-52页
  ·植物离体组织和细胞再生的研究进展第14-28页
    ·植物细胞全能性第14-15页
    ·植物细胞决定作用第15页
    ·植物细胞分化第15-17页
    ·植物细胞脱分化第17-20页
    ·再分化第20页
    ·离体组织器官发生第20页
    ·体细胞胚胎发生第20-28页
  ·农杆菌介导的植物遗传转化研究进展第28-40页
    ·农杆菌及 Ti质粒生物学特性第28-29页
    ·农杆菌转化系统的优点第29页
    ·农杆菌转化植物的分子机制第29-34页
    ·T- DNA整合的分子机制第34-39页
    ·植物对于农杆菌侵染的抗性第39-40页
    ·影响农杆菌转化效率的因素第40页
  ·甜菜碱合成基因工程第40-48页
    ·甜菜碱的生物合成第41-42页
    ·与甜菜碱合成有关的酶及其编码基因第42-44页
    ·甜菜碱合成基因工程第44-48页
  ·油菜转基因育种研究进展第48-51页
    ·建立高效转化体系的影响因素第48-50页
    ·应用于油菜等芸苔属植物性状改良的基因转化第50页
    ·油菜遗传转化中存在问题及展望第50-51页
  ·研究目的和意义第51-52页
第2章 甘蓝型油菜花茎高效再生体系研究第52-56页
  ·材料和方法第52-53页
    ·试验材料第52页
    ·试验方法第52-53页
  ·结果与分析第53-55页
    ·预培养对外植体分化的促进作用第53页
    ·激素配比对不定芽诱导的影响第53-54页
    ·AgNO_3对花茎离体再生能力影响第54-55页
  ·讨论第55-56页
第3章 甘蓝型油菜幼胚培养与体细胞胚胎发生研究第56-63页
  ·材料与方法第56-57页
    ·植物材料第56页
    ·离体培养第56-57页
  ·结果与分析第57-61页
    ·不同发育时期的油菜胚胎在离体条件下的胚后发育模式第57-58页
    ·愈伤组织形成第58页
    ·体细胞胚胎发生第58-61页
  ·讨论第61-63页
第4章 甘蓝型油菜子叶和下胚轴再生体系研究第63-69页
  ·材料与方法第63-64页
    ·试验材料第63页
    ·培养基第63页
    ·无菌实生苗的建立和外植体培养第63页
    ·子叶和下胚轴外植体对抑菌剂的敏感性实验第63页
    ·子叶和下胚轴外植体对 Km浓度敏感性试验第63-64页
  ·结果与分析第64-68页
    ·子叶和下胚轴外植体的再生方式第64页
    ·不同基因型间子叶和下胚轴再生能力的差异第64-65页
    ·抑菌剂胁迫下油菜子叶和下胚轴外植体的再生能力第65-66页
    ·卡那霉素对油菜子叶和下胚轴外植体芽再生能力的影响第66-68页
  ·讨论第68-69页
第5章 农杆菌介导的油菜子叶和下胚轴的遗传转化研究第69-81页
  ·材料与方法第69-74页
    ·植物材料第69页
    ·质粒与农杆菌菌株第69-70页
    ·培养基第70页
    ·农杆菌活化与培养第70-71页
    ·植物外植体培养第71页
    ·共培养第71页
    ·转化细胞筛选与再生第71页
    ·转化体生根第71页
    ·转化体 PCR鉴定第71-73页
    ·转基因植株 BADH活性分析第73-74页
  ·结果与分析第74-78页
    ·转化体的获得第74-75页
    ·外植体对农杆菌侵染的反应与再生第75页
    ·共培养方式对外植体再生的影响第75-76页
    ·AgNO_3对外植体再生的影响第76-77页
    ·转基因植株的获得与PCR检测第77页
    ·BADH酶活性鉴定第77页
    ·CMO转化体的获得与耐盐性评价第77-78页
  ·讨论第78-81页
第6章 农杆菌介导油菜IN PLANTA整体转化体系的研究第81-93页
  ·材料与方法第81-86页
    ·植物材料第81页
    ·质粒第81-82页
    ·农杆菌转化第82-83页
    ·In planta转化油菜第83-84页
    ·GUS基因活性瞬时表达鉴定第84页
    ·抗生素抗性筛选第84-85页
    ·GUS基因 PCR鉴定第85页
    ·BADH基因PCR检测分析第85页
    ·CMO基因转化体抗盐能力评价第85-86页
    ·试剂第86页
  ·结果与分析第86-91页
    ·工程菌的鉴定第86页
    ·油菜的花器结构和开花特点第86-87页
    ·农杆菌蘸花侵染对油菜结实的影响第87-88页
    ·GUS基因瞬时表达鉴定第88-89页
    ·卡那霉素抗性和潮霉素抗性系的筛选第89页
    ·转化体鉴定第89-91页
  ·讨论第91-93页
    ·In planta转化法对油菜的有效性第91页
    ·转化的最佳时期第91-93页
结论第93-95页
参考文献第95-109页
致谢第109-110页
作者简介第110页
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