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梨离体再生和遗传转化的研究
中文名称: 梨离体再生和遗传转化的研究
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论文编号: 3116629收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Study on Regeneration in Vitro and Genetic Transformation of Pear
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 果树学
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 离体再生 农杆菌介导 遗传转化
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 本研究以砀山酥梨(P.bretschnrid(略)hd.)、八月红梨(P.communis L.X P.bretschnrideri Rehd.)等多个栽培品种为试验材料,通过对影响叶片、叶柄和节间茎段离体再生不定芽以及根癌农杆菌(Agrobacterium (略)ciens)介导的遗传转化的若干因素的研究,建立起不同外植体水平的梨再生体系以及遗传转化体系.利用几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶双价基因进行了遗传转化,分子生物学分析证明,几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶双价基因已经整合到转化植株基因组中,获得了八月红梨和砀山酥梨(略)基因植株. 主要研究结果如下: 1.试验从砀(略)等5个梨品种叶片诱导出不定芽,其中砀山酥、八月红、早酥梨等品种叶片再生不定芽为首次获得,建立起八月红、水晶和砀山酥梨等品种叶片高效再生体系. 试验系统地研究了影响梨叶片再生不定芽的多种因子的效应,建立起叶片高效再生体系.在最佳条件下,八月红、水晶和砀山(略)率分别100%、77.8%和83.3%,平均再生芽数分别为5.78、3.17和1.58. 不同品种叶片再生效率不...
Several pear scion cultivars 'Dangshansu','Bayu(omitted)tarkrimson', 'Zaosu'and 'Suisho' were chosen as materials(omitted)tors that influence adventitious bud regeneration from leave, petiole, and internode segment, and Agrobacterium tumefaciens-mediated genetic transforma(omitted)ar were examined. The regeneration system of different explants and genetic transformation of pear were deve(omitted)ngshansu', and 'Bayuehong' were transformed with P-l,3-glucanase and chitinase genes, and t(omitted)plants w...
目录:
摘要第4-6页
ABSTRACT第6页
第1章 文献综述第13-31页
  ·果树遗传转化研究进展第13-18页
    ·果树遗传转化方法第14-15页
      ·农杆菌介导法(Agrobacterium-mediated transformation)第14页
      ·基因枪转化法(Microprojectile bombardment)第14-15页
      ·其它转化方法第15页
    ·影响果树遗传转化的主要因素第15-16页
      ·农杆菌的侵染能力第15-16页
      ·转化受体材料第16页
      ·农杆菌vir基因的活化第16页
    ·植物基因工程在果树品种改良中的应用第16-18页
      ·培育抗病虫害新品种第16-17页
      ·改良果实性状第17页
      ·培育矮化品种第17页
      ·其它性状的改良第17页
      ·展望第17-18页
  ·梨再生体系研究进展第18-22页
    ·叶片培养第18-21页
      ·基因型第18-19页
      ·培养基类型第19页
      ·植物激素种类及配比第19页
      ·外植体和处理方式第19-20页
      ·暗培养第20页
      ·碳源第20页
      ·其它第20-21页
    ·花药培养第21页
    ·原生质体培养第21-22页
    ·小结第22页
  ·梨遗传转化研究进展第22-26页
    ·梨遗传转化进展情况第23-25页
      ·转化方法和受体材料第23页
      ·农杆菌菌株第23页
      ·转化的外源基因第23-25页
      ·转化的品种和砧木第25页
      ·其它方面第25页
    ·问题和展望第25-26页
  ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖酶基因及其应用研究第26-30页
    ·几丁质酶的特性和作用原理第26-27页
    ·β-1,3-葡聚糖酶的特性和作用原理第27-28页
    ·几丁质酶和β-1,3-葡聚糖在抗真菌病害中的应用第28-30页
  ·本试验研究目的和意义第30-31页
第2章 梨离体再生体系的建立研究第31-51页
  ·材料和方法第31-33页
    ·试验材料第31页
    ·培养基第31页
    ·无菌材料的建立第31页
    ·试管苗继代第31页
    ·叶片再生第31-32页
      ·叶片离体培养第31页
      ·叶片再生不定芽增殖第31-32页
      ·叶片再生苗生根第32页
    ·叶柄再生第32-33页
    ·不带腋芽的节间茎段再生第33页
    ·培养条件第33页
    ·有关指标的调查方法第33页
      ·叶片、叶柄和节间茎段再生效率第33页
      ·增殖倍数、生根率和平均生根数第33页
  ·结果与分析第33-51页
    ·叶片再生第34-46页
      ·叶片外植体的大量获取研究第34页
      ·叶片不定芽再生的动态过程第34-35页
      ·叶片再生培养基初步筛选第35-36页
      ·不同暗培养时间对叶片再生不定芽的影响第36页
      ·叶片接种方式对叶片再生不定芽的影响第36-37页
      ·叶片外植体类型对梨叶片再生不定芽的影响第37页
      ·不同激素配比对八月红和水晶梨叶片再生的影响第37-38页
      ·不同激素配比对砀山酥和红茄梨叶片再生的影响第38-39页
      ·品种基因型对叶片再生的影响第39-40页
      ·不同质量浓度AgNO_3对叶片再生的影响第40页
      ·不同质量浓度蔗糖对叶片再生的影响第40-41页
      ·培养基的pH值对叶片再生的影响第41页
      ·不定芽增殖第41-43页
      ·叶片再生苗生根第43-46页
    ·叶柄再生第46-48页
      ·叶柄不定芽再生的过程第47页
      ·激素对梨叶柄再生的影响第47页
      ·不同质量浓度AgNO_3对梨叶柄再生的影响第47-48页
      ·不定芽的增殖和生根第48页
    ·不带腋芽的节间茎段再生第48-51页
      ·茎段不定芽再生的过程第48-49页
      ·不同激素配比对茎段再生的影响第49-50页
      ·不定芽增殖和生根第50-51页
第3章 农杆菌介导的梨遗传转化研究第51-67页
  ·材料和方法第51-56页
    ·植物材料第51页
    ·实验菌株第51页
    ·培养基和试剂第51页
    ·选择性抗生素敏感性试验第51-52页
      ·Km敏感性试验第51页
      ·Nm敏感性试验第51-52页
    ·抗菌素浓度的选择第52页
    ·农杆菌介导基因转化第52-53页
      ·菌种保存第52页
      ·农杆菌培养第52页
      ·侵染第52页
      ·转化芽的筛选与植株再生第52-53页
    ·转基因植株的检测第53-56页
      ·转化植株对Km的抗性分析第53页
      ·植物总DNA的提取第53页
      ·质粒DNA的提取第53-54页
      ·PCR检测第54页
      ·Southern杂交检测(Dot blotting)第54-56页
  ·结果与分析第56-67页
    ·Km对梨叶片再生的影响第56-58页
    ·Nm对梨叶片再生的影响第58页
    ·Nm对梨茎尖生长和增殖的影响第58-59页
    ·Cef对梨叶片再生的影响第59-60页
    ·农杆菌浓度对梨转化的影响第60页
    ·农杆菌感染时间对梨转化的影响第60页
    ·共培养对梨转化的影响第60-62页
      ·共培养时间对梨转化的影响第61页
      ·共培养的培养基类型对梨转化的影响第61-62页
    ·添加AS对梨转化的影响第62页
    ·选择方式对梨转化的影响第62页
    ·以梨节间茎段为受体材料的遗传转化第62-63页
    ·转化芽的获得和筛选第63页
    ·转化植株的生根检测第63-64页
    ·转化植株的PCR检测第64页
    ·转化植株的Southern杂交检测第64-67页
第4章 讨论第67-73页
  ·影响梨离体叶片再生的内部因子第67-68页
  ·影响梨离体叶片再生的外部因子第68-69页
  ·梨叶片再生苗生根第69-70页
  ·梨叶柄和节间茎段再生第70-71页
  ·离体再生体系对转化的影响第71页
  ·外植体的脱菌培养第71页
  ·转化体的选择培养第71-72页
  ·关于提高梨离体再生和遗传转化效率第72-73页
第5章 结论第73-75页
  ·梨离体再生第73页
  ·梨遗传转化第73-75页
参考文献第75-86页
致谢第86-87页
个人简介第87页
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