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北京鸭胸肌发育候选基因的研究
中文名称: 北京鸭胸肌发育候选基因的研究
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论文编号: 3116567收藏本论文】【我的收藏】【我要投稿
英文名称: Research on the Candidate Gene for Beijing''s Breast Muscle Development
学位类型: 博士毕业论文
作者: 涉及隐私,隐去***  作者本人请参看权力声明>>
导师: 涉及隐私,隐去***
毕业学校: 涉及隐私,隐去***
专业: 动物遗传育种与繁殖
毕业年份: 涉及隐私,隐去***
关键字: 北京鸭 胸肌 肌生成素基因 肌细胞抑制素基因 生长激素 胰岛素样生长因子 生长激素释放激素
简介目录: 点击此处 免费索取本论文简介和目录>>
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论文摘要: 北京鸭驰名中外,对世界肉鸭品种的改良和肉鸭生产水平的提高做出了极大贡献.但北京鸭存在胸肌率低,胸肌发育较晚的特点.为提高北京鸭胸肌率及促进北京鸭胸肌发育的相对提前,本试验研究了候选基(略)、GH(GHR)、IGF-1、MyoG在北京鸭胸肌的表达特点及对候选基因多态与胸肌发育相关指标进行了关联分析,同时对鸭GHRH基因进行了克隆.研究结果如下: 1(略)北京鸭MSTIN、GHR、IGF-1基因的部分cDNA序列以及MyoG基因外显子1的部分序列,碱基序(略)550bp(GenBank收录号DQ168594)、345bp(GenBank收录号DQ137140)、507bp(Genbank收录号DQ168593)和260bp(GenBank收录号DQ13(略)其推测的氨基酸序列长度分别为MSTIN基因182个氨基酸(GenBank收录号ABA02292),GHR基因12(略)GenBank收录号ABZ50386),IGF-1基因168个氨基酸(GenBank收录号ABA02291),MyoG外显子1 86个氨基酸(GenBank收录号AAZ72963).这些序列的克隆...
Beijing ducks is a famous bree(omitted).It plays important roles in ducks breeding and ducks industry development in the world. But the developments of(omitted)scle of Beijing ducks have two characteristic. The(omitted)scle rate was low and the development of breas(omitted)as relative late.In order to improve the development of Beijing duck’s breast muscle.we researched the expression of MSTIN, GHR, I(omitted) in brest muscle and the relative analysis of the polymorphism candidate gene with the ca...
目录:
摘要第4-7页
ABSTRACT第7-9页
前言第16-18页
第一部分 文献综述第18-42页
  · 骨骼肌的发生与发育第18-23页
    ·骨骼肌的发生第18-19页
    ·肌肉发育的调控第19-23页
    ·结语第23页
  · 细胞生成素基因研究进展第23-28页
    ·MyoG 基因的定位与结构第23-24页
    ·MyoG 基因表达的时间性第24-26页
    ·MyoG 基因的多态性第26-27页
    ·小结第27-28页
  · 肌肉生长抑制素基因研究进展第28-33页
    ·MSTIN 基因的结构第28-29页
    ·MSTIN 基因的遗传效应及同源性分析第29页
    ·MSTIN 基因的定位第29页
    ·MSTIN 基因的功能第29-30页
    ·MSTIN 基因的作用机制第30-31页
    ·MSTIN 基因的特异性表达第31-32页
    ·MSTIN 基因的突变及多态性第32页
    ·MSTIN 基因的应用前景第32-33页
  · 胰岛素样生长因子系统组成及生理功能第33-36页
    ·IGF 系统的组成第33-34页
    ·IGF-I 的作用机理第34-35页
    ·IGF-1 的促生长作用第35页
    ·IGF-1 与肌肉生长的关系第35-36页
  · 生长激素基因结构及生理作用第36-39页
    ·GH 基因的结构第36-37页
    ·GHR 基因的结构第37页
    ·GH 与 GHR 间的信号传导第37-38页
    ·GH 的促生长作用第38-39页
    ·GH 对物质代谢的影响第39页
  · GHRH 核酸质粒对动物生长的促进作用第39-42页
    ·GHRH 的结构第39-40页
    ·GHRH 的功能第40页
    ·GHRH 促进GH 分泌的机理第40页
    ·GHRH 核酸制剂的制备与应用第40-42页
第二部分 实验研究第42-136页
  实验一 北京鸭 GHR、IGF-1、MSTIN、MyoG 基因的克隆与序列分析第42-61页
    ·材料和方法第42-49页
      ·材料第42-44页
      ·方法第44-49页
    ·结果第49-56页
      ·RNA 的提取第49-50页
      ·RT-PCR 扩增结果第50页
      ·PCR 扩增产物的克隆第50页
      ·菌落PCR 扩增检测第50页
      ·PCR 测序结果第50-54页
      ·克隆序列的遗传分析与生物信息学分析第54-56页
    ·讨论第56-59页
      ·MyoG 基因的克隆与分析第56-57页
      ·IGF-1 基因的克隆与分析第57页
      ·MSTIN 基因的克隆与分析第57-58页
      ·GHR 基因的克隆与分析第58-59页
    ·结论第59-61页
  实验二 不同日龄北京鸭胸肌组织MyoG、GHR、IGF-1、MSTIN 基因表达的发育性变化研究..第61-71页
    ·材料和方法第61-62页
      ·样品采集第61页
      ·RNA 提取与反转录第61页
      ·引物设计第61-62页
      ·平台期的确定第62页
      ·半定量PCR 法检测不同日龄北京鸭胸肌组织目标基因mRNA 的表达丰度第62页
    ·实验结果第62-65页
      ·RNA 的提取第62页
      ·目标基因的扩增次数第62-63页
      ·候选基因表达丰度的发育性变化第63-65页
    ·讨论第65-70页
      ·关于MyoG 基因表达的时间性分析第65-67页
      ·不同日龄北京鸭胸肌MSTIN 基因表达丰度的变化第67-68页
      ·不同日龄北京鸭胸肌GHR 基因表达丰度的变化第68-69页
      ·不同日龄北京鸭胸肌IGF-1 基因表达丰度的变化第69-70页
    ·结论第70-71页
  实验三 GH 基因多态性与北京鸭胸肌发育相关性状的关联分析第71-93页
    ·材料和方法第71-81页
      ·材料第71-73页
      ·方法第73-81页
    ·结果与分析第81-87页
      ·基因组 DNA 提取第81页
      ·GH 基因组DNA 的PCR 扩增结果第81-82页
      ·SSCP 检测结果与分析第82-83页
      ·RFLP 检测结果与分析第83页
      ·GH 内含3 的基因型频率及其等位基因频率第83页
      ·GH 引物1 多态位点基因型 Hardy-weinberg 平衡的χ~2 适合性检验第83-84页
      ·GH 多态位点序列的测定第84-85页
      ·GH 内含子3 标记位点纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量第85页
      ·GH 内含子355CP 多态与北京鸭胸肌的相关性分析第85-87页
    ·讨论第87-92页
      ·采样及 DNA 提取第87-88页
      ·PCR-RFLP 分析第88-89页
      ·PCR-SSCP 研究分析第89-90页
      ·GH 内含子4 的RFLP 分析第90-91页
      ·GH 内含子3 SSCP 多态位点与北京鸭胸肌发育候选指标的相关性分析第91-92页
      ·GH 内含子3 多态性位点的群体遗传分析第92页
    ·结论第92-93页
  实验四 IGF-1 基因多态性与北京鸭胸肌发育相关性状的关联分析第93-102页
    ·材料和方法第93-94页
      ·引物设计第93-94页
      ·PCR 扩增条件第94页
      ·其它第94页
    ·结果第94-100页
      ·IGF-1基因组DNA的PCR扩增结果第94-95页
      ·引物IGF-5’end(2)扩增结果的酶切分析第95-96页
      ·引物IGF-5’末段扩增产物SSCP分析结果第96-97页
      ·引物IGF-5’end(5)扩增产物的基因型频率及其等位基因频率第97页
      ·引物IGF-5’end(5)扩增产物多态Hardy-weinberg 平衡检验第97-98页
      ·引物IGF-5’end(5)扩增产物标记位点纯合度、杂合度、有效等位基因数和多态信息含量第98页
      ·IGF-5 末端多态位点碱基序列的测定第98页
      ·引物IGF-5’end(5)扩增产物SSCP 多态性与北京鸭胸肌的相关性分析第98-100页
    ·讨论第100-101页
      ·IGF-1 5’末端的 RFLP 分析第100-101页
      ·北京鸭 IGF-1 5’末端序列的SSCP 分析第101页
      ·北京鸭IGF-1 5’末端序列多态位点的群体遗传学分析第101页
    ·结论第101-102页
  实验五 MyoG 基因多态性与北京鸭胸肌发育相关性状的关联分析第102-105页
    ·材料和方法第102-103页
      ·引物设计第102页
      ·PCR 扩增条件第102-103页
      ·其它第103页
    ·结果第103-104页
      ·基因组DNA 的PCR 扩增结果第103页
      ·PCR 产物的SSCP 分析结果第103-104页
    ·讨论第104-105页
  实验六 鸭 MSTIN 基因部分序列的基因组PCR 扩增第105-111页
    ·材料和方法第105-106页
      ·引物设计第105页
      ·其它第105-106页
    ·结果与分析第106-110页
      ·MSTIN DNA PCR 扩增结果及阳性克隆的鉴定第106页
      ·MSTIN 基因组 PCR 扩增测序结果第106-108页
      ·克隆序列的生物信息学分析第108-110页
    ·结论第110-111页
  实验七 MSTIN 基因多态性与北京鸭胸发育相关性状的关联分析第111-121页
    ·材料和方法第111-112页
      ·材料第111页
      ·方法第111-112页
    ·结果与分析第112-118页
      ·基因组PCR 扩增结果第112-113页
      ·PCR-SSCP 检测结果与分析第113-114页
      ·MSTIN 外显子3 的群体遗传学分析第114-116页
      ·MSTIN 外显子3 PCR 产物碱基序列的测定第116页
      ·MSTIN 外显子3 多态位点与胸肌发育指标的相关性分析第116-118页
    ·讨论第118-120页
      ·关于鸭SSCP、RFLP 多态分析引物的设计第118-119页
      ·MSTIN 基因的多态性分析第119-120页
      ·MSTIN 基因外显子3 的群体遗传学分析第120页
    ·结论第120-121页
  实验八 北京鸭GHRH 基因的克隆与分析第121-136页
    ·材料第121页
      ·试验动物及样品采集第121页
      ·主要实验仪器和器械第121页
      ·溶液配制第121页
      ·试剂盒第121页
    ·方法第121-126页
      ·实验原理第121页
      ·引物设计第121-122页
      ·RT(反转录反应)和PCR 扩增第122-123页
      ·PCR 产物的回收第123-124页
      ·连接第124页
      ·感受态细胞的制备第124页
      ·转化第124页
      ·重组质粒DNA 的快速鉴定—Cracking 法第124页
      ·重组质粒DNA 的提取第124-125页
      ·酶切第125-126页
      ·测序第126页
    ·结果第126-134页
      ·RNA 提取第126页
      ·GHRH1 primer ,M13 primer 4 RT-PCR 扩增结果与产物的鉴定及序列分析第126-129页
      ·GHRH(中)引物RT-PCR 扩增结果与产物的鉴定及序列分析第129-134页
    ·讨论第134-135页
    ·继续研究的内容第135页
    ·结论第135-136页
第三部分 总结论第136-138页
第四部分 参考文献第138-153页
第五部分 附录第153-178页
第六部分 缩略词第178-180页
致谢第180-181页
个人简介第181页
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